导　　师： 智发朝

授予学位： 博士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 背景和目的：　　结直肠癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一，研究认为其发病与自身基因改变及肠道菌群关系密切。研究发现HIF-1通路在结肠癌组织中活跃表达，相关抑制剂也在研发中，但由于缺乏特异性，其在阻断肿瘤细胞上述靶标的同时必然影响免疫细胞。HIF-1α-HIF-1β通路在髓系免疫细胞中发挥重要作用，而髓系免疫细胞与肿瘤的发生发展及肠道菌群均关系密切。所以，我们拟探究骨髓髓系来源免疫细胞缺失Hif-1α及Hif-1β是否会对肠道肿瘤及肠道菌群产生影响。　　方法：　　通过PCR鉴定小鼠的基因型，用qPCR检测被敲除基因的残余表达量。采用AOM/DSS造模来观察髓系免疫细胞Hif-1α或Hif-1β基因缺失对小鼠肠道肿瘤形成的影响、液相蛋白芯片检测细胞因子含量、流式细胞术检测各型免疫细胞比例。通过检测血清DAO及内毒素来评价肠屏障功能、16s rRNA测序分析肠道菌群的构成、RTCA检测粪菌代谢产物对HT-29细胞的影响、ELISA检测粪菌代谢产物刺激BMDM细胞后细胞因子的分泌情况、混养CKO及WT小鼠来验证肠道菌群对肠道肿瘤生成的影响。　　结果：　　经过qPCR检测，Hi1αf/f,lysM-cre+和Hif-1βf/f,lysM-cre+小鼠的被敲基因在其巨噬细胞转录水平分别降低了80％～90％及60％～70％，这两种小鼠(CKO小鼠)与WT小鼠血清DAO及内毒素含量无差异。通过16s rRNA测序没有发现同窝来源的CKO与WT小鼠粪便菌群间存在差异，且CKO与WT小鼠粪菌代谢产物对HT-29细胞生长的影响没有差异，刺激BMDM细胞分泌的TNF-α及IL-1β含量也无差异。　　经过AOM/DSS造模，Hif-1αf/f,lysM-cre+与其同窝WT小鼠的体重变化、DAI评分及结肠长度、肿瘤个数、肿瘤直径之和都没有显著差异，但是Hif-1βf/f,lysM-cre+小鼠的肿瘤个数与肿瘤直径之和都显著大于其同窝WT小鼠。Hif-1βf/f,lysM-cre+小鼠造模后血清多种

关 键 词： 肠道肿瘤 肠道菌群 髓系免疫细胞 基因 基因 基因缺失

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