导　　师： 邓小梅

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 杨树是重要的经济树种，也是研究林木基因工程的模式植物。杨树转基因技术研究可以打破种属之间的限制，突破远缘杂交不亲和性的困难，是目前杨树进行遗传改良及新品种选育的新方法。本研究以毛白杨（Populus tomentosa Carrière）为受体材料，将水稻（Oryza sativa）中一个与光呼吸改造途径相关的多基因载体GOC-PYL1305通过农杆菌介导的叶盘法导入杨树植株内，以期提高杨树光合速率并降低光呼吸损耗，最终获得高质、高光效杨树工程植株，主要研究内容如下：　　1、建立了高效的毛白杨再生体系。以添加0.4mg/L苄基腺嘌呤（6-BA）、0.1mg/L萘乙酸（NAA）和0.01mg/L噻苯隆（TDZ）的MS培养基为叶片分化培养基;以添加0.4mg/L苄基腺嘌呤（6-BA）和0.1mg/L萘乙酸（NAA）的MS培养基为不定芽伸长培养基;以 MS0培养基为生根培养基对毛白杨不同外植体进行组培扩繁。试验结果表明，毛白杨叶片增殖系数最高可达到7.98，不定芽分化率接近100%，所建立的毛白杨再生体系为之后的遗传转化研究提供了优良的受体材料。　　2、以高效的组培再生体系为基础，优化了毛白杨遗传转化体系。通过抗生素敏感实验，确定了遗传转化体系中潮霉素（Hyg）最佳临界浓度为10 mg/L;头孢噻肟钠（Cef）最佳抑菌浓度为200 mg/L。设计正交试验确定了菌液浓度、侵染时间、预培养时间、共培养时间以及是否加入乙酰丁香酮等条件的最佳组合，建议用MS液体悬浮菌体至OD=0.6，侵染经过2d预培养的毛白杨叶片15-20min，暗培养2d，放入添加200μmo l乙酰丁香酮（ AS）的共培养基培养2d为毛白杨最优遗传转化体系。　　3、拟利用在水稻中克隆的与光呼吸改造相关的多基因载体对杨树光呼吸途径进行改造。将水稻外源基因GLO3、OXO3和CAT2（简称GOC）导入杨树叶绿体中，使杨树光呼吸产生的乙醇酸�

关 键 词： 毛白杨 转基因技术 基因 光呼吸损耗 光合速率

领　　域： []