导　　师： 赵青

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 广州医科大学

摘　　要： 本文从以下两个部分进行探讨：　　第一部分 WIN55，212－2联合金诺芬对人肝癌细胞HepG2增殖与凋亡的影响　　目的：　　大麻作为已被使用治疗某些疾病有多个世纪的草药，本身有抗肿瘤的活性,能够在体外抑制肿瘤细胞增殖,诱导凋亡。金诺芬是一种具有抗炎作用的磷化烃金化合物。近年来，金诺芬对肿瘤细胞的细胞毒作用得到了证实，是一个有潜力的肿瘤靶向治疗的药物。但该两种药物联用抗肿瘤的临床和实验研究目前尚未有报道。因此，探讨大麻素受体激动剂WIN55，212-2（WIN）联合金诺芬（Auranofin，AF）对人肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的影响，并对其机制进行初步研究。　　方法：　　分别用5μmol/L WIN、0.25μmol/L AF、5μmol/L WIN联合0.25μmol/L AF处理HepG2细胞24h和48h后，MTS法检测细胞活力;采用AnnexinV-FITC和PI双染色法并通过流式细胞仪分析细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bip、ATF4、PARP、Caspase3、Caspase8、Caspase9）表达的变化。分别用5μmol/L WIN联合0.25μmol/L AF、Z-VAD-FMK以及Z-VAD-FMK预处理1h后再用5μmol/L WIN联合0.25μmol/L AF处理HepG2细胞24h，Western blot检测蛋白PARP、Caspase3、Caspase8、Caspase9的变化。　　结果：　　与两药单独使用相比，WIN联合AF明显抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡，可以引起Bcl-2蛋白表达水平下调，内质网应激反应相关蛋白Bip、ATF4蛋白表达水平上调，以及活化Caspase3、Caspase8、Caspase9，引起PARP蛋白的切割。加入Caspase广谱抑制剂Z-VAD-FMK处理细胞后，能部分逆转联合用药的细胞凋亡比例。　　结论：　　WIN55，212-2联合金诺芬能有效诱导肝癌细胞凋亡，其机制可能与Bcl-2表达下调，内质网应激反应和Caspase系统活化相关。　　第二部分 TSPAN31下调其靶基因CDK4抑制子宫颈癌细胞的增殖　　目的：　　天然反义转录物（natural antisense tr

关 键 词： 肝癌 大麻素受体激动剂 金诺芬 子宫颈癌 基因 靶基因

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