导　　师： 侯之启

授予学位： 博士

作　　者： (）;

机构地区： 暨南大学

摘　　要： 目的：探讨胰岛素样生长因子结合蛋白2（Insulinlike growth factor binding protein2，IGFBP2）对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞（RA-FLS）生物学行为的作用，以及IGFBP2对细胞外调节蛋白激酶（Extracellular regulated protein kinases1/2，ERK1/2）的作用。　　方法：首先，原代培养类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞（RA-FLS）和正常成纤维样滑膜细胞（FLS），并采用qRT-PCR、Western blot及免疫荧光技术检测IGFBP2mRNA和蛋白在FLS和RA-FLS中的表达水平。其次，RA-FLS细胞被转染siRNA-IGFBP2和siRNA-NC，qRT-PCR检测IGFBP2在RA-FLS细胞中的干扰效果;CCK-8实验检测IGFBP2敲低后对RA-FLS细胞增殖能力的影响;流式细胞仪检测IGFBP2敲低后对RA-FLS细胞凋亡的影响;Transwell检测IGFBP2敲低对RA-FLS细胞侵袭能力的影响;划痕实验检测IGFBP2敲低对RA-FLS细胞迁移能力的影响。此外，RA-FLS细胞转染IGFBP2siRNAs48小时后，提取总蛋白质，Western blot检测RA-FLS中IGFBP2、ERK和p-ERK蛋白的表达水平。　　结果：IGFBP2在FLS细胞与RA-FLS细胞中表达情况：qRT-PCR和western blot分别在mRNA和蛋白表达水平检测显示IGFBP2在RA-FLS细胞中表达明显高于FLS细胞。敲低RA-FLS细胞中IGFBP2后会抑制RA-FLS细胞增殖、迁移和侵袭能力，RA-FLS细胞凋亡率增加。此外，敲低IGFBP2也会下调p-ERK1/2蛋白表达，但ERK1/2表达无明显变化。　　结论：IGFBP2在RA-FLS细胞中高表达;IGFBP2可通过ERK1/2信号通路调控RA-FLS增殖、迁移、侵袭和凋亡;敲低IGFBP2表达能够抑制RA-FLS细胞增殖、迁移和侵袭，促进RA-FLS细胞凋亡，说明可以将IGFBP2作为治疗RA的一个潜在靶点进行研究。

关 键 词： 类风湿性关节炎 病理机制 胰岛素样生长因子结合蛋白 成纤维样滑膜细胞 生物学行为

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