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文献详细Journal detailed

利用黑水虻幼虫制备胰蛋白胨的工艺研究

导  师: 胡文锋;安新城

授予学位: 硕士

作  者: ;

机构地区: 华南农业大学

摘  要: 黑水虻学名亮斑扁角水虻(Hermetia illucens L.),是双翅目水虻科扁角水虻属昆虫,幼虫营腐生性。黑水虻抗逆性强、易养殖,且幼虫(干燥)蛋白和油脂含量较高,可用于抗菌肽提取、壳聚糖制备、护肤品开发、生物柴油转化等研究。目前,黑水虻在中国南方很多地区已广泛养殖,具有良好的市场开发前景。 蛋白胨(Peptone)是动物植物蛋白经过酸、碱或者酶水解而得到的一种由(蛋白质与蛋白胨的中间产物之一)、胨、肽、氨基酸为主要成分的水溶性混合物。1880年Naegeli首次将蛋白胨在细菌培养中进行应用并获得更为显著的培养效果之后,蛋白胨便成为微生物培养、分离和鉴定的主要营养氮源,也是检测、发酵、医药、免疫等相关研究不可或缺的生化试剂。 本课题以黑水虻幼虫为原料,经干燥、粉碎、脱脂后采用酶解的方式进行加工。采用索氏抽提法对黑水虻幼虫(干燥)进行脱脂处理,并确定最佳的提取有机试剂及抽提时间。以水解产物上清液中氨基态氮含量为指标,确定加工中合适的蛋白酶、缓冲液及其浓度。单因素(缓冲液pH值、水解温度、胰蛋白酶添加量、水解时间、底物添加量)试验确定合适的水平,五因素四水平设计L16(45)正交试验以对水解工艺优化,得到最佳的黑水虻脱脂蛋白粉水解实验条件。水解产物经离心取上清液,真空冷冻干燥、粉碎后获得蛋白胨。通过理化指标分析和微生物测试,与市场上购买的商品胰蛋白胨产品进行对比。 研究结果如下: (1)丙酮相对乙醚及石油醚更适合黑水虻脱脂,最佳提取时间为6 h。胰蛋白酶相对于木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶而言,水解黑水虻脱脂蛋白粉的效果最理想,结果差异极显著,产物中氨基氮含量分别是以上蛋白酶的15.68、8.43、20.12、6.50倍。�

关 键 词: 黑水虻 胰蛋白酶 蛋白胨 工艺优化

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