导　　师： 金丰良

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 昆虫免疫反应与其生长发育时期具有相关性，不同的发育阶段昆虫抵抗病原物感染的能力不同。为探讨免疫反应和生长发育的相互关系，本研究对小菜蛾（Plutella xyllostella）不同生长发育阶段的转录组进行测序，利用生物信息学分析了小菜蛾不同发育时期的差异表达相关基因和可变剪接，筛选了小菜蛾免疫与发育的共同调控因子及差异基因，为探讨害虫免疫与发育的相互关系提供了分子网络;C型凝集素（C-type lectins，CTLs）是一类含有特异性糖类识别域（carbohydrate-recognition domain，CRD）的Ca2+依赖型模式识别受体，能特异性地识别病原物并且可以启动免疫反应，在昆虫免疫与发育中具有重要作用。运用RT-PCR结合RACE技术克隆了PxCTL5基因的全长序列，以此为基础，在体外进行了高效原核表达，并制备了多克隆抗体;分别利用qRT-PCR技术和Western blot技术检测其在不同细菌诱导后mRNA和蛋白水平上的表达模式;利用PxC TL5蛋白的凝集活性检测了对不同细菌的凝集作用。本研究结果为研究免疫与发育的相互调控作用提供了分子理论基础。　　为探讨免疫反应和生长发育的相互关系，利用高通量测序技术测得了小菜蛾4龄幼虫期、蛹期和成虫期三个变态发育过程中的9个转录组。小菜蛾每个发育阶段获得的平均c lea n read s分别为16,266,300条，16,597,631条和16,275,979条;获得的平均碱基量分别为2,033,287,500 nt，2,094,632,500 nt和2,034,497,417 nt，每个样品测得2 G的碱基量。4龄幼虫期、蛹期和成虫期得到新的转录本分别为1131、1474和1361个，可变剪切数分别为8854、14075和11793个，SNP位点分别为105197、160897和133363个。将小菜蛾三个发育阶段的转录组进行两两比较，运用生物信息学统计分析，根据限定条件筛选差异表达的基因。4龄幼虫期-成虫期对比组，上调差异基因数为456个，�

关 键 词： 小菜蛾 转录组 型凝集素 生长发育 基因功能 调控作用

领　　域： []