导　　师： 何小维;康可人

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 华南理工大学

摘　　要： α-羟丁酸脱氢酶为乳酸脱氢酶同功酶之一，在人体内普遍存在，可应用于多种疾病的早期诊断筛查。人体血液中α-羟丁酸脱氢酶的测定对鼻咽癌、肺癌、妊娠期肝内胆汁淤积症、镰状细胞病等多种疾病的辅助诊断有重要的指导作用。目前临床上检测α-羟丁酸脱氢酶的方法为液生化法，但此方法需要大型的自动化生化仪器，仪器价格昂贵，且需要成熟的技术人员进行操作。目前市场上还没有简单、快速、操作方便的POCT检测方法可应用于临床上。本研究利用干式生化检测原理和技术研制了一种快速检测人体中α-羟丁酸脱氢酶的干化学试纸，同时配套自行开发的小型台式反射光度计可以定量检测人体血液当中的α-羟丁酸脱氢酶含量，经过临床验证性能符合临床需要，形成的产品己获得CFDA注册文号，可以投入临床实际应用。该产品填补了国内外干化学产品的空白，具有操作简便、检测时间短、试剂成本低等特点，在国内外市场有广泛的应用前景。　　本研究设计了单因子及全因子实验对试纸材进行料筛选及试纸配方的优化。确定了测试条件：测试波长为550nm，反应时间为120s，加样量为15μL;对试纸反应中涉及到的底物浓度、缓冲溶液pH值和离子浓度、显色剂浓度、表面活性剂种类及稳定剂、辅酶和保护剂主要组分进行优化。试纸的配方优化结果：α-羟丁酸的浓度为15mmol/L、缓冲液离子浓度为100mmol/L、pH值为8.2、显色剂浓度为50mmol/L、吐温-20的浓度为0.5%，稳定剂浓度为4%，辅酶浓度为10%，保护剂浓度为1%。对试纸材料进行筛选，试剂层选用15μm孔径的CNPC-SS12，扩散层选用PES30/24，中间层选用6613。　　将优化后配方应用于试剂层中，结合筛选好的膜材组装成试纸，对试纸的精密度、准确度、线性范围、稳定性和抗干扰性进行验证。结果表明：

关 键 词： 快速定量检测 羟丁酸脱氢酶 干化学方法 全因子实验

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