导　　师： 邓利

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 深圳大学

摘　　要： 神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)是一种由36个氨基酸残基组成的神经活性多肽,广泛分布于脊椎动物中枢和外周神经系统,是含量最丰富的神经肽之一。NPY含有5个酪氨基酸残基,因其富含酪氨酸(Y),故被称为神经肽酪氨酸,属于胰多肽家族的一员。目前研究的脊椎动物中都发现有NPY,且不同物种间的NPY存在较高同源性。NPY除了可作为神经递质发挥作用,还具有提高摄食率与能量储存、降低紧张与应激等功能。NPY是目前发现活性最强的促摄食因子。本研究克隆了斜带石斑鱼NPY成熟肽序列,应用pET-SUMO大肠杆菌表达载体连接,成功构建表达斜带石斑鱼NPY成熟肽的pET-SUMO-NPY载体,通过原核大肠杆菌BL21(DE3)表达出可溶性蛋白。将NPY加入离体培养鲤鱼下丘脑-垂体组织碎片体系中,利用荧光定量PCR技术,检测NPY对鲤鱼下丘脑-垂体组织GH、GtH和PSS-2基因表达的影响。结果显示,浓度为100 nM的重组斜带石斑鱼NPY(r-ec NPY)显著上调了GH基因转录水平(P<0.05),重组及化学合成的NPY均显著下调了PSS-2基因的表达(P<0.05)。重组NPY组和合成NPY组对GtH基因表达的影响未达到统计学的显著性(P>0.05)。因此证明重组表达的斜带石斑鱼NPY具有生物活性。本研究将重组NPY按浓度梯度添加到饲料中,对锦鲤进行为期6周的投喂实验。在第三周,对照组、Group-0.15(0.15μg r-ecNPY/g饲料)、Group-0.3(0.3μg r-ecNPY/g饲料)及Group-0.5(0.5μg r-ecNPY/g饲料)的周摄食率分别为4.079%、4.198%、4.284%及4.42%,经统计分析显示,在第3周Group-0.5的摄食率显著高于对照组(P<0.05),证明重组NPY添加到饲料中对锦鲤的摄食具有一定的促进作用。摄食实验结束后,计算鲤鱼相关的生长及营养指标。结果显示,对照组、Group-0.15、Group-0.3及Group-0.5的特定生长率(specific growth rate,SGR)分别为1.5%、1.45%、1.42%及1.45%。对照组、Group-0.15、Group-0.3及Group-0.5的日摄食率分别为3.9

关 键 词： 重组表达 体外活性 摄食 斜带石斑鱼 鲤鱼

领　　域： []