导　　师： 雷红涛

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 真菌毒素是由真菌产生的有毒次级代谢产物，在农产品生长、收获、贮藏、加工等过程中均会遭到侵染，对人畜健康造成巨大威胁。赭曲霉毒素（OT）、黄曲霉毒素（AFT）和玉米赤霉烯酮（ZEN）是其中污染较为广泛的极其重要的三种，这些毒素均有免疫毒性、细胞毒性和致癌作用，并广泛存在于花生、玉米等谷物及其制品，饲料以及肉制品中。解决真菌毒素污染问题已成为农产品安全的重要课题，本文真对三种真菌毒素建立了免疫学检测方法，主要研究内容如下：　　1)赭曲霉毒素的广谱性酶联免疫检测方法的建立：　　本研究以赭曲霉毒素A（OTA）和赭曲霉毒素B（OTB）为半抗原，采用活泼酯法分别偶联不同蛋白得到四种多克隆抗体，再通过酶联免疫法进行条件优化及抗体性能筛选，得到的抗体中OTB-BSA-Ab使用OTB-OVA包被的灵敏度及广谱性最佳，可用于同时检测赭曲霉毒素A、B和C，对OTA，OTB和O TC进行检测的IC50分别为0.5，0.6和0.09 ng/mL线性范围分别为0.03~10.4，0.02~15.4和0.01~0.9 ng/mL，最低检测限LOD分别为0.005，0.001 and0.001 ng/mL。并使用分子模拟分析抗体抗原识别可能位点进行原因浅析，氯原子可较大地提升电负性，增强分子与抗体的结合，而乙酰酯基的电势趋近于人工抗原中小分子与载体蛋白连接处赖氨酸的碳链的电势，并或许可增加其疏水作用力，因此导致抗体抗原识别能力大大增强，氯原子与乙酰酯基的协同作用或许是抗体对 OTC识别能力强的关键因素。使用小米及玉米样品确定方法可靠性，在用PBS T稀释15倍后可消除基质效应，且所建立的ELISA方法与HPLC有良好的线性相关性，故此ELISA方法具备良好的可靠性。　　2)黄曲霉毒素B1的特异性酶联免疫检测方法的建立：　　使用新型衍生方法制备黄曲霉毒素 B1的半抗原，通过活泼酯法偶联�

关 键 词： 赭曲霉毒素 黄曲霉毒素 玉米赤霉烯酮 酶联免疫检测 农产品安全

领　　域： []