导　　师： 贺松其

授予学位： 博士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 目的：　　NF-κB与Wnt/β-catenin信号通路交互串话在调控HSC活化增殖及肝纤维化发生发展中具有重要作用，探讨这两条信号通路交互串话调控HSC活化的作用机制对研究肝纤维化的发病机制及治疗靶点具有重要意义。本研究以肝纤维化模型动物及活化的肝星状细胞HSC-T6为研究对象，首先采用抑制剂作用肝纤维化小鼠及慢病毒转染HSC的方法，探讨NF-κB与Wnt/β-catenin交互串话调控HSC活化的分子机制。在此基础上，研究鳖甲寡肽I-C-F-6对HSC及四氯化碳诱导肝纤维化大鼠中β-catenin、p65及NF-κB信号通路的影响，明确鳖甲寡肽I-C-F-6抗肝纤维化的作用机理。　　方法：　　1.分别使用β-catenin、p65蛋白抑制剂作用于CCl4诱导肝纤维化小鼠，HE及Masson染色观察小鼠肝脏病理形态的改变，免疫组化、PCR、western blot、ELISA检测NF-κB及Wnt/β-catenin信号通路相关信号分子和下游靶基因的表达水平。　　2.慢病毒转染HSC-T6细胞株，PCR、western blot、免疫荧光、免疫沉淀检测NF-κB及Wnt/β-catenin信号通路相关信号分子及下游靶基因表达，研究p65与β-catenin是否存在相互作用。　　3.鳖甲寡肽I-C-F-6分别作用于HSC和CCl4诱导肝纤维化大鼠，HE及Masson染色观察大鼠肝脏病理形态的改变，免疫组化、western blot检测β-catenin及NF-κB信号通路相关信号分子的表达水平。　　结果：　　1.在CCl4诱导肝纤维化小鼠模型中，β-catenin蛋白和p65蛋白高表达，抑制β-catenin蛋白后，IκBα蛋白增加，p65蛋白表达上升，NF-κB信号通路显著活化，小鼠肝纤维化加重;抑制p65蛋白后，β-catenin蛋白上升，Wnt信号通路显著活化，小鼠肝纤维化加重。　　2.活化的HSC-T6中p65和β-catenin蛋白高表达，使用慢病毒转染HSC细胞敲减p65蛋白后，β-catenin蛋白表达上升，HSC内Wnt/β-catenin活化增强，CTGF、TGF-β1合成增加;敲减β-catenin蛋白后�

关 键 词： 肝纤维化 信号通路 交互串话 分子机制 鳖甲寡肽 中药药理 临床疗效

领　　域： [] []