导 师: 陈建新
授予学位: 硕士
作 者: ();
机构地区: 华南农业大学
摘 要: 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的高度传染性疾病,临床上成年猪表现为厌食、发热,妊娠母猪发生流产、早产、产死胎、弱仔、木乃伊胎,仔猪呼吸困难等症状,猪群中一旦感染该病毒便很难根除。PRRS V广泛传播于世界各个地区,我国华东、华南区于2006年爆发该传染病,给我国的养殖业发展造成重创。迄今为止,主要通过疫苗免疫的手段进行预防和治疗。但一方面疫苗免疫存在返毒威胁的危险性,另一方面PRRS V进化出各种逃避宿主的免疫机制,导致疫苗的应用效果受到限制。药物是病毒性疾病防治的第二道防线,但目前尚未出现被批准用于防治PRRS的药物。近年来,大量研究表明天然低毒的中草药对病毒有显著的预防治疗作用,因此,从天然化合物中筛选有效的抗病毒药物成为当前研究的热点。 本研究评价了双氢青蒿素在体外对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)作用效果。采用间接免疫荧光法从青蒿素类化合物中筛选出对PRRS病毒有明显抑制效果的单体----双氢青蒿素和青蒿琥酯,同时由于双氢青蒿素具有比其他同类药物易溶、低毒的特性,本研究着重选择了双氢青蒿素作为后期试验中抗PRRS病毒活性的研究药物,并进一步探讨其作用机理。-建立了PRRSV感染Marc-145细胞的体外药效评价模型,MTT试验确定双氢青蒿素的药效,间接免疫荧光法确定最佳药物作用浓度。然后通过荧光定量PCR和蛋白免疫印迹(Western blot)实验,在病毒感染48 h后测定双氢青蒿素的抗PRRSV药效。再分三种不同的作用模式考察双氢青蒿素对PRRS病毒感染Marc-145细胞不同阶段的影响,即药物与病毒直接作用,药物预先作用于细胞,药物作用病毒感�