导　　师： 宁云山

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 背景:　　口腔鳞状细胞癌(OSCC)是最常见的人类恶性肿瘤之一，它约占头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)的90％以上，但其发病机理还不清楚。TCGA(The Cancer Genome Atlas)结果显示，表观遗传修饰蛋白NSD1、EZH2和细胞命运决定者Notch1在HNSCC中发生高频突变，提示它们可能与OSCC的发生和发展有关。OSCC浸润性强、颈部淋巴结转移早、复发率高，目前临床治疗主要以手术切除为主，并辅以放疗和化疗，但患者术后生活质量差、预后不理想。因此，发掘具有潜在临床治疗价值的候选药物具有重要意义。我们前期研究显示，番荔枝内酯(ACGs)可抑制OSCC细胞的增殖，但机制不明。　　目的:　　阐述NSD1、EZH2和Notch1在ACGs抑制OSCC细胞增殖中的作用和机制，为OSCC的诊断和治疗提供新策略和新靶点。　　方法:　　1.分析ACGs对SCC15细胞的增殖、凋亡、周期、克隆形成和迁移的影响;2.通过qRT-PCR和Western Blot分析ACGs作用SCC15细胞后，NSD1、EZH2和Notch1表达变化;3.构建下调或上调NSD1、EZH2和Notch1的SCC15细胞稳定株，通过MTT和流式细胞术分析ACGs对稳定株细胞增殖、凋亡和周期的影响;通过Western Blot分析NSD1、EZH2和Notch1在上述稳定株中的表达差异;4.通过MTT和Western Blot分析EZH2抑制剂EPZ6438作用SCC15细胞后，细胞增殖及NSD1、EZH2和Notch1表达变化;5.通过全转录组测序分析ACGs对SCC15细胞转录水平的影响。　　结果:　　1.ACGs显著抑制SCC15细胞增殖、克隆形成和迁移;2.qRT-PCR和Western Blot结果显示，在SCC15细胞中，ACGs上调NSD1的表达，抑制EZH2及其下游靶基因c-Myc表达，抑制Notch1信号通路的激活;3.下调SCC15细胞中NSD1表达拮抗ACGs介导的细胞增殖抑制和凋亡;4.上调SCC15细胞中EZH2表达拮抗ACGs介导的细胞增殖抑制和细胞周期阻滞，促进细胞凋亡;而上调SCC15细胞中N1ICD表达拮抗ACGs介导的细胞增殖抑制，抑制细胞凋亡�

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