导　　师： 李国新

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 目的和意义:　　尽管在过去几十年中手术和化疗在肿瘤治疗上取得很大进展，但胃癌(GC)仍是全球癌症相关死亡率的第三大常见原因，其占所有癌症相关死亡人数的8.8％。早期检测中缺乏生物标志物和发生腹膜转移是胃癌治疗失败的主要原因。所以找到预测疾病进展的分子生物标志物可能促进胃癌药物的开发和治疗策略的改善。　　方法:　　高通量mRNA测序(RNA-seq)结果显示X型胶原蛋白1(COL10A1)是疾病进展相关基因。103例胃癌患者的组织样本QPCR分析结果显示，COL10A1mRNA高表达与胃癌转移和存活率降低存在显著相关性。使用UCSC基因组网站和JASPAR数据库分析COL10A1的启动子序列，预测潜在的转录因子SOX9结合位点。收集胃癌患者的癌组织和对应的正常胃粘膜组织，利用免疫组化技术进行SOX9和COL10A1表达的定位定量检测分析。同时，收集受检患者的临床资料及随访生存预后的相关信息。接着通过QPCR和Western blot实验分别在转录水平和翻译水平验证SOX9和COL10A1的临床相关性。构建过表达COL1OA1和敲低COL10A1的稳转细胞株，同时用转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激胃癌细胞株，通过Western blot实验检测TGF-β信号通路相应指标的变化，以及与肿瘤转移相关的EMT指标和金属基质酶家族蛋白的变化，验证COL1OA1与TGF-β信号通路之间的关系。　　内容:　　在本研究中，证明了SOX9和COL10A1在胃癌组织中表达上调。观察到在胃癌细胞株和组织中SOX9和COL10A1的表达模式之间存在正相关。电泳迁移率变动分析(EMSA)，染色质免疫沉淀(ChIP)分析和荧光素酶报告基因的结果表明，SOX9可以直接与COL10A1基因启动子结合并激活其转录。生物功能学实验表明，COL10A1能够促进胃癌细胞的迁移和侵袭。敲低COL10A1可以抑制裸鼠转移模型中的肺部和腹腔内转移。此外，用TGF-β1处理细胞后，可以上�

关 键 词： 胃癌 细胞转移 病理机制 型胶原蛋白 转录组测序

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