导　　师： 詹若挺; 严萍

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 广州中医药大学

摘　　要： 目的:提高三叉苦药材的质量标准,为三叉苦药材质量控制体系的建立提供参考。通过小鼠巨噬细胞RAW264.7体外抗炎模型和抗氧化清除自由基试验初步评价三叉苦提取物体外抗炎和抗氧化能力,为综合开发利用三叉苦资源提供依据。方法:采用薄层色谱法对三叉苦药材进行定性鉴别;采用分光光度计法对总生物碱、总黄酮测定方法进行研究;建立三叉苦药材中N-反式-对香豆酰酪胺、茵芋碱、白鲜碱、吴茱萸春碱HPLC含量测定方法;建立三叉苦HPLC指纹图谱,并采用相似度分析、聚类分析、主成分分析评价其质量。通过三叉苦主要成分动态变化和抗氧化活性研究,初步考察不同采收期对三叉苦药材质量的影响。通过脂多糖刺激巨噬细胞产生炎症,体外建立RAW264.7小鼠巨噬细胞炎症模型。以三叉苦不同部位提取物进行给药,并设置空白组、对照组、阳性药组和高、中、低给药组,测定细胞炎症因子NO、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10表达量,初步确定三叉苦的抗炎活性组分。从15种不同型号的大孔树脂中筛选适用于三叉苦总黄酮纯化的最佳树脂,并考察最佳型号大孔树脂的纯化工艺条件,对所获得的总黄酮纯化产物进行抗氧化能力测定。结果:完善三叉苦质量标准,制定了水分、浸出物、总灰分及酸不溶性灰分的参考限量;建立了三叉苦药材的薄层色谱鉴别方法;建立三叉苦N-反式-对香豆酰酪胺、茵芋碱、白鲜碱、吴茱萸春碱含量测定方法和总黄酮、总生物碱测定方法;建立了化学成分HPLC的药材指纹图谱。采收期的不同对带叶嫩枝部位的总黄酮含量和抗氧化活性造成一定影响,带叶嫩枝8、9月采收的药材质量较好。通过建立体外细胞炎症模型,评价三叉苦不同提取物的抗炎能力,结果表明嫩枝叶提取物的抗炎能力优于茎提取物,三叉苦嫩枝叶乙酸乙酯提取物的抗炎能力优于其他提取物。通过筛选不同型号的大孔树脂,确定HPD100树脂为纯化三叉苦总黄酮最佳树脂,并获得最佳树脂的纯化工艺的最优条件,对其纯化物进行抗氧化能力实验,结果显示三叉苦总黄酮提取物具有较好抗氧化能力。结论:本研究所建立的质量控制方法可以用于三叉苦的质量控制标准提升,建立的物质纯化方法可以用于三叉苦物质基础研究,三叉苦体外抗炎作用结果可以作为体内实验的参考依据。更多还原

关 键 词： [1752806]三叉苦 质量标准 [5195336]抗炎 [5195650]抗氧化

分 类 号： [R285.5]

领　　域： []