导　　师： 刘琼

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 深圳大学

摘　　要： 阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease,AD)是一种年龄相关的神经退行性疾病,其特征是认知和记忆功能逐渐丧失。环状RNA在调节基因表达中发挥重要作用,它们在中枢神经系统中高度富集。ciRS-7作为一种环状RNA,有报导它在AD病人脑中显著性下降,但其对AD的作用和机制目前尚不清楚。本研究采用qPCR技术检测了ciRs-7在AD模型细胞系N2a-sw和HEK293/tau、原代培养的神经元和12月龄三转基因AD模型小鼠(3×Tg-AD)中的表达情况,结果发现与其非AD的对照组相比较,AD组中ciRs-7的表达水平均降低。在3×Tg-AD模型小鼠脑中ciRs-7的表达量随着月龄的增加先增后降,说明ciRS-7与小鼠生长及AD形成过程有密切的联系。在N2a-sw细胞中过表达ciRS-7后,利用Western blot检测了?-淀粉样蛋白(A?)级联通路中关键蛋白APP、BACE1、Aβ等的蛋白表达水平,发现它们均下调,说明在AD模型细胞中ciRS-7的上调可以抑制A?级联通路。为了进一步研究ciRS-7在N2a-sw细胞中的作用通路,将其过表达后进行定量蛋白质组学分析,结果发现:ciRS-7在N2a-sw细胞中主要通过与RNA结合,RNA剪接和加工等生物过程,发挥其生物功能。在此基础上,本研究进一步以HEK293/tau为研究对象,检测了其中ci RS-7的表达水平,发现在tau过表达的AD细胞系中,ciRS-7水平上调,同时APP蛋白下调、BACE1蛋白表达水平无明显变化。该结果与已知的ciRS-7下调APP蛋白表达水平的报道相一致,说明HEK293/tau细胞中tau蛋白的过表达可通过上调ci RS-7来下调APP蛋白。为进一步研究ciRS-7在HEK293/tau细胞中的作用,将其在该细胞中过表达后进行了定量蛋白质组学分析,结果发现:ciRS-7在HEK293/tau细胞中主要发挥蛋白结合、RNA结合的功能,参与羧酸代谢和含氧酸代谢等过程。本研究还检测了AD小鼠中及给药后ciRS-7的水平。对2月龄3×Tg-AD小鼠补充硒酸钠4个月后,检测海马中ciRS-7的表达量,并进行转�

关 键 词： 阿尔茨海默症 淀粉样蛋白 淀粉样蛋白前体 蛋白 蛋白质组学

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