导　　师： 何小维

授予学位： 博士

作　　者： (）;

机构地区： 华南理工大学

摘　　要： 心血管疾病(Cardiovascular diseases,CVDs)是全世界范围内致死的头号原因,每年死于CVDs的死亡人数多于任何其他原因死亡的人数。心肌梗死(Myocardial infarction,MI)是缺血性心脏病的常见表现,据《中国心血管报告2017》显示,近15年来,我国的心肌梗死死亡率总体情况呈现上升趋势,并且个体发病率呈现年轻化。因此,能够有效提前检测MI标志物,预测MI的发生与发展,对于潜在患者的预防与救助救治都具有非常重要的意义。本论文利用免疫层析技术(Lateral flow immunoassay,LFIA),针对心肌肌钙蛋白I(Cardiac troponin I,cTnI)和C反应蛋白(C-reactive protein,CRP),基于纳米载体理论开发了一种快速检测技术应用于MI标志物的临床检测。采用一步法合成具有明显功能性区域划分的核壳结构纳米微球,通过调控实验参数结合分子动力学模拟技术研究了微球的合成机理;通过测定荧光染料对抗体蛋白二级结构的影响作用探讨了荧光染料与检测方法学稳定性的关系;构建了红色和绿色荧光微球体系用于cTnI和CRP的临床快速检测,解决了检测平台开发过程中的关键技术问题,有效地提高了检测方法的灵敏性与稳定性,具有重要的理论意义与实用价值。本论文使用免疫学、高分子化学和材料学知识,结合计算机模拟技术,系统地研究了抗体合成,荧光免疫微球合成与制备,检测卡组装与仪器调试,临床真实样品检测等整个检测平台开发过程中的科学问题与技术难题,主要研究结果如下:(1)获得3株稳定分泌抗cTnI单克隆抗体(cTnI-Monoclonal antibodies,cTnI-McAb)的阳性杂交瘤细胞,通过小鼠单抗IgG类/亚类检测试剂盒鉴定出3株抗体的亚型均为IgG1,抗体在4℃和-20℃保存6个月后仍保持良好的稳定性。(2)通过调控实验参数(引发剂、功能性单体、反应温度和搅拌速度),制备了粒径范围从200 nm到600 nm,形貌均一,分散性良好的羧基功

关 键 词： 心肌梗死标志物 心肌肌钙蛋白 反应蛋白 荧光微球 免疫层析技术

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