导　　师： 曾其毅

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 研究背景:脓毒症是由感染引起的全身炎症反应综合征,临床上可发展为严重脓毒症、脓毒症休克和多器官障碍综合征,死亡率高,是ICU患者死亡的主要原因之一。严重脓毒症发生时,可出现多个器官的功能损伤,形成多器官功能障碍,其中肾脏的损伤较为常见,发展成为急性肾损伤,脓毒症诱导的急性肾损伤大约占了ICU中急性肾损伤的50%。miRNAs是一类非编码小分子RNA,其通过特异性识别靶基因mRNA来抑制蛋白翻译或诱导mRNA的降解,从而在转录后水平调控基因的表达。miRNA-21参与多个细胞进程,如:癌细胞的增长和侵袭,心肌缺血性损伤,上皮细胞间质转化,缺血性肾损伤等。然在脓毒症急性肾损伤方面的研究报道却比较少,故本研究试探索miRNA-21与脓毒症急性肾损伤的关系。研究目的:1.探讨脂多糖刺激的人肾皮质近曲小管上皮细胞在不同时间点miR-21及炎症因子的表达;2.探讨被上调的miR-21在LPS刺激的人肾皮质近曲小管上皮细胞炎症反应中所发挥的作用;3.初步探索被上调的miR-21在LPS刺激的人肾皮质近曲小管上皮细胞炎症反应中发挥作用的机制。研究方法:1.构建HK-2细胞(人肾皮质近曲小管上皮细胞)的脓毒症模型,在LPS刺激的HK-2细胞中选择Oh、4h、8h、12h四个时间点来检测miR-21、MKK3mRNA和炎症因子表达水平的变化;2.在LPS处理的人肾皮质近曲小管上皮细胞中用Western Blot方法检测靶蛋白MKK3的表达;3.将miR-21 mimics及其阴性对照物转染至HK-2细胞,然后用LPS刺激。用RT-qPCR方法检测炎症因子的mRNA水平,Westem Blot检测炎症因子的蛋白水平;4.统计方法:用SPSS20.0统计软件分析数据,计量资料用均数±标准差表示,采取两独立样本t检验分别对两组数据进行检验,P<0.05,为差异有统计学意义。研究结果:1.LPS刺激4、8、12小时后miR-21表达水平相比空白对照组均下调(P<0.05),IL-6及MKK3mRNA相对表达水平相

关 键 词： 刺激 细胞 动态 表达变化

领　　域： [] []