导　　师： 张蓉

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 目的卵巢癌是妇科恶性肿瘤中发病率第三但致死率最高的一种疾病,由于临床症状不显著以及广泛的化疗耐药现象,导致多年来治疗效果一直不理想[1]。其中,卵巢癌化疗抵抗一直是严重影响卵巢癌患者生存预后的关键因素之一[2]。虽然有关研究提出多种关于化疗抵抗发生的假说,但其中具体机制并不是十分清楚[3]。本研究通过分析数据库中不同化疗方案的上皮性卵巢癌患者体内瘦素表达水平与生存情况的关系,利用体外细胞化疗敏感性实验,流式细胞周期分析,染色质免疫共沉淀技术及基因集富集分析等方法研究了瘦素在上皮性卵巢癌化疗抵抗中可能存在的分子机制,从而探讨瘦素作为上皮性卵巢癌患者化疗方案评估及预后预测指标的可能性。方法1、对TCGA数据库中1656例上皮性卵巢癌病人按照不同的化疗方案分组,利用Kaplan-Meier技术,分析瘦素表达量对总体生存率的影响;2、利用Oncomine,cBioportal等多种数据库进一步分析验证瘦素表达水平与疾病进展及生存预后之间的关系;3、利用Cell Counting Kit/WST-8(CCK8)法摸索各种常用化疗药在卵巢癌细胞系中应用的适宜浓度及对应IC50;4、体外细胞水平验证在外源性瘦素重组蛋白作用下卵巢癌细胞对一线化疗方案(顺铂+紫杉醇/多烯紫杉醇)的敏感性变化;5、利用流式细胞周期检测技术验证瘦素对紫杉醇类化疗药改变肿瘤细胞周期能力的影响;6、利用基因集富集分析(GSEA)技术寻找瘦素发挥紫杉醇类化疗药抵抗作用的下游基因集变化;7、利用转录因子预测网站及染色质免疫共沉淀技术(chip)寻找调控瘦素表达的上游转录因子;8、使用荧光素酶基因报告系统检测并验证瘦素上游转录因子结合启动区位点。结果1、Kaplan-Meierplotter网站分析发现瘦素高表达患者在铂类联合紫杉醇类(紫杉醇n= 220,多烯紫杉醇n=108)化疗方案中生存率�

关 键 词： 卵巢癌 瘦素 紫杉醇 化疗抵抗 上皮间充质转化

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