导　　师： 宋泽庆

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 广东医科大学

摘　　要： 【目的】：　　探讨丙戊酸钠在肺上皮细胞自噬和EMT过程中的作用，为肺纤维化治疗的潜在药物靶点提供依据。　　【方法】：　　1.分离出小鼠原代II型肺泡上皮细胞（AT2）。以不同浓度（0、1 mmol/L、2 mmol/L、4 mmol/L）的丙戊酸钠(Sodium Valproate,VPA)分别处理人肺癌上皮细胞H1299、H441及AT2细胞，免疫印迹法检测APE1乙酰化表达情况及自噬相关蛋白LC3-II、Belcin-1表达情况。　　2.以不同浓度（0、1 mmol/L、2 mmol/L、4 mmol/L）的VPA分别处理人肺癌上皮细胞H1299、H441及AT2细胞，免疫印迹法检测间质相关蛋白Vimentin和细胞外基质Collagen-I表达情况。　　3.以TGF-β1（0 ng/ml）、TGF-β1（5 ng/ml）、TGF-β1（5 ng/ml）+VPA(2 mmol/L)、VPA(2 mmol/L)分别处理人肺癌上皮细胞H1299、H441及AT2细胞，免疫印迹法检测EMT相关蛋白Vimentin及E-cadherin表达情况。　　【结果】：　　1. VPA可促进H1299、H441 、AT2细胞发生自噬　　与空白组相比，不同浓度VPA组AC-APE1/APE1比值增高，自噬相关蛋白LC3-II、Beclin-1均表达上调，差异有统计学意义（P<0.05），验证VPA可促进H1299、H441 、AT2细胞中APE1乙酰化增加。提示VPA可促进H1299、H441、AT2细胞发生自噬。　　2. VPA可抑制H1299、H441、AT2细胞间质相关蛋白的表达及细胞外基质的生成　　与空白组相比，不同浓度 VPA 组间质相关蛋白 Vimentin 及细胞外基质Collagen-I的表达均下调，差异有统计学意义（P<0.05）。表明VPA可抑制H1299、H441、AT2细胞间质相关蛋白的表达及细胞外基质的生成。　　3.VPA可抑制H1299、H441、AT2细胞中TGF-β1诱导的EMT过程　　与空白组，TGF-β1（5 ng/ml）处理组E-cadherin表达下调，Vimentin上调，差异均有统计学意义（P<0.05）。与TGF-β1（5 ng/ml）组相比TGF-β1（5 ng/ml）+VPA(2 mmol/L)处理后，E-cadherin表达明显上调，Vimentin下调，差异均有统计学意义（P<0.05）。表�

关 键 词： 丙戊酸钠 细胞自噬 肺纤维化 上皮间充质转化

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