导 师: 赖小平
授予学位: 博士
作 者: ;
机构地区: 广州中医药大学
摘 要: 目的: 近江牡蛎是我国南部沿海常见的养殖贝类。其壳为中药材“牡蛎”的来源之一;其肉品质鲜美、富含多种营养成分,且具有多种生物活性;尤其是近江牡蛎多糖具有抗氧化、生精、免疫调节等活性。因此如何合理、科学地开发近江牡蛎资源是一个有意义的课题。当前关于近江牡蛎多糖的研究报道虽然不少,但不够深入。因此本文拟以中医理论为依据,应用现代技术手段,以近江牡蛎肉为原材料,系统研究近江牡蛎多糖分离、纯化工艺及其理化性质,并对其进行硒化修饰,得到硒化近江牡蛎多糖。研究近江牡蛎多糖体外抗氧化活性及其作用机制,进而研究其对环磷酰胺致氧化应激小鼠生精能力的影响,探讨近江牡蛎多糖改善环磷酰胺致氧化应激小鼠生精活力的作用机制。为近江牡蛎多糖相关药物研究积累资料。为其开发成药品及相关功能保健食品奠定理论基础。 方法: 1.近江牡蛎多糖提取、分离及纯化 采用超声辅助提取近江牡蛎肉中多糖,将近江牡蛎粗多糖用磁性壳聚糖微球(MCM)吸附去除蛋白质,再用DEAE-纤维素52及Sephadex G100柱分离纯化粗多糖,得到纯化多糖组分。 2.近江牡蛎多糖理化性质及结构鉴定 采用苯酚硫酸法测定总糖含量,考马斯亮蓝法测定蛋白质含量,BaCl2-明胶法测定硫酸基含量,乌氏粘度计法测定多糖相对粘度,乙酰化反应-GC法测定近江牡蛎多糖的单糖组成,HPLC测定纯度及分子量,UV法测定吸收情况,FT-IR法测定官能团及糖环形式,甲基化、GC-MS测定糖苷键连接位点、糖基链接次序及分支情况,NMR法测定异头碳构型、羟基取代情况及糖基链接次序,采用刚果红法测定糖链是否具有三股螺旋结构。 3.近江牡蛎多糖硒化修饰 通过BaCl2-HNO3催化,采用Na2SeO3硒化修饰近江牡蛎多糖,得到其硒