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木质素对复合纤维素酶的吸附规律及木质纤维素酶解强化的研究

导  师: 楼宏铭

授予学位: 硕士

作  者: ();

机构地区: 华南理工大学

摘  要: 木质纤维素酶解糖化是木质纤维素通过糖平台转化为燃料乙醇的关键环节。在酶解糖化过程中,纤维素酶吸附在纤维素上是纤维素酶降解纤维素的重要前提。然而,木质素会无效吸附纤维素酶,降低纤维素酶的利用率,导致酶解成本居高不下。本文利用石英晶体微天平(QCM-D)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术研究复合纤维素酶(CTec2)在木质素上的吸附行为,分析了木质素与纤维素酶之间的相互作用力,在此基础上研究了β-葡萄糖苷酶和尿素对木质纤维素酶解的影响,阐述了其强化酶解的机理。首先,采用QCM-D技术研究缓冲液pH、离子强度和尿素对CTec2在木质素膜上吸附行为的影响。结果表明,当缓冲液pH从3.6升至5.7时,CTec2在木质素上的吸附量先增大后减小,当pH为4.8时,CTec2的吸附量随离子强度的增加而减少,说明CTec2与木质素之间存在静电作用;当pH为4.8时,CTec2在木质素上的吸附量随尿素的增加而减少,说明CTec2和木质素之间存在氢键作用。其次,利用SDS-PAGE技术研究缓冲液pH、离子强度、尿素和表面活性剂对CTec2中各个组分在木质素上吸附的影响。结果表明,缓冲液pH、离子强度、尿素及表面活性剂对β-葡萄糖苷酶BGL、内切酶EG III和内切酶EG V在木质素上吸附的影响很小,但对外切酶CBH I、外切酶CBH II、内切酶EG I、内切酶EG II、内切酶EG IV及木聚糖酶Xyn的影响很大,其中BGL、EG III和EG V在木质素上的吸附率维持在8000%之间。CTec2中各个组分与木质素之间的结合力大小排序为:BGL、EG III和EG V最大,Xyn次之,CBH I、CBH II、EG I、EG II和EG IV最小。当缓冲液pH为4.8时,增加离子强度和尿素浓度对BGL和EG III在木质素上吸附的影响很小,说明在酶解条件下BGL和EG III与木质素之间的相互作用以疏水作用为主。当缓冲液pH为4.8时,增加尿素浓度和离子强度均能减少CBH I在木质素上的吸附量,说�

关 键 词: 木质素 吸附 酶解

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