导　　师： 王玉霞

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 暨南大学

摘　　要： 第一部分检测脂联素及其受体在PCOS小鼠子宫内膜、卵巢及胚胎组织中的表达情况目的:通过检测脂联素及其受体在多囊卵巢综合征（polycystic ovarian syndrome,PCOS）小鼠子宫内膜组织、卵巢及胚胎组织中的表达情况,观察PCOS小鼠与正常小鼠子宫内膜组织、卵巢及胚胎组织中脂联素及其受体在胚胎着床窗口期的表达的变化,探讨脂联素对PCOS小鼠对受孕率影响。方法:1.采用脱氢表雄酮皮下注射的方法构建PCOS小鼠模型,造模成功后将小鼠随机分为4组,分别为:正常未孕组（正常未处理小鼠）10只、正常受孕组（正常小鼠促排卵处理后进行交配）20只、PCOS未孕组（PCOS造模成功后未处理小鼠）10只、PCOS受孕组（PCOS造模成功后促排卵处理后进行交配）20只。2.受孕4d时提取各组小鼠子宫内膜、卵巢组织及孕鼠胚胎,通过用免疫组化方法测定各组小鼠子宫内膜、卵巢组织及免疫荧光方法测定胚胎中脂联素及其受体1和2的表达。3.受孕4d时提取各组小鼠子宫内膜、卵巢组织及孕鼠胚胎RNA,采用Real-time PCR的方法检测脂联素及其受体1和2 mRNA在小鼠子宫内膜、卵巢组织及胚胎中的表达。4.实验数据用均数±标准差表示,应用SPSS13.0进行统计学分析,采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.对照组小鼠发情周期基本正常,PCOS组小鼠发情周期紊乱。对照组小鼠子宫、卵巢表面鲜红,卵巢表面未见明显扩张卵泡;PCOS组小鼠子宫表面血管扩张充血,卵巢表面苍白且可见多个大小不等扩张卵泡。2.正常受孕组胚胎着床数量明显多于PCOS受孕组（P<0.05）。3.免疫组化结果显示,脂联素（Adiponectin,AdipoQ）、脂联素受体1（Adiponectin receptor 1,AdipoR1）、脂联素受体2（Adiponectin receptor 2,AdipoR2）均可在小鼠子宫内膜、卵巢及胚胎组织中表达。PCOS组子宫内膜、卵巢AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2表达均低于对照组（P<0.05）;PCOS未孕组与受孕组间AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2在子宫内膜、卵巢表达无显著差异（P>0.05）。A2免疫荧光结果显示,PCOS组胚胎AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2表达均低于正常受孕组（P<0.05）。4.AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2 m RNA均可在小鼠子宫内膜、卵巢及胚胎组织中特异性表达。PCOS受孕组子宫内膜AdipoQ mRNA表达显著低于正常受孕组（P<0.05）,而AdipoR1及AdipoR2 mRNA表达显著高于正常受孕组（P<0.05）。PCOS受孕组及未孕组卵巢AdipoR1、AdipoR2 mRNA表达均高于正常对照组（P<0.05）;AdipoR1、AdipoR2 mRNA在PCOS受孕组胚胎组织中表达高于正常受孕组（P<0.05）。结论:脂联素及其受体在PCOS小鼠子宫内膜组织、卵巢组织、胚胎组织中表达低于正常小鼠,脂联素可能是通过脂联素受体1、2表达的变化调控小鼠子宫内膜、卵巢功能,从而影响PCOS小鼠受孕率。第二部分不同浓度外源性脂联素对PCOS小鼠受孕率影响的初步观察目的:通过检测PCOS小鼠皮下注射不同浓度脂联素后子宫内膜、卵巢及胚胎中脂联素及其受体的表达情况,初步探究脂联素对PCOS小鼠受孕率的影响。方法:1.用脱氢表雄酮皮下注射法构建PCOS模型,造模成功并确认小鼠受孕后将其随机分为4组,分别为:A组（对照组,注射生理盐水）5只、B组(注射脂联素1μg/kg·d-1)10只、C组(注射脂联素10μg/kg·d-1)10只、D组(注射脂联素100μg/kg·d-1)10只,每只小鼠皮下注射1次/天,共4天。2.受孕4d时提取各组小鼠子宫内膜、卵巢组织及胚胎,通过用免疫组化方法测定各组小鼠子宫内膜、卵巢组织及免疫荧光方法测定胚胎中脂联素及其受体1和2的表达。3.受孕4d时提取各组小鼠子宫内膜、卵巢组织及胚胎RNA,采用Real-time PCR的方法检测脂联素及其受体1和2 mRNA在小鼠子宫内膜、卵巢组织及胚胎中的表达。4.实验数据用均数±标准差表示,应用SPSS13.0进行统计学分析,采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.C组(注射脂联素10μg/kg·d-1)胚胎着床数量明显多于A组（对照组）、B组(注射脂联素1μg/kg·d-1)、D组(注射脂联素100μg/kg·d-1)（P<0.05）。2.AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2在B组(注射脂联素1μg/kg·d-1)、C组(注射脂联素10μg/kg·d-1)、D组(注射脂联素100μg/kg·d-1)子宫内膜表达高于A组（对照组）（P<0.05）。C组AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2在子宫内膜、卵巢中表达显著高于其他组,具有统计学意义（P<0.05）。AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2均可在小鼠胚胎组织中表达。各组间无显著性差异（P>0.05）。3.A组（对照组）子宫内膜、卵巢及胚胎组织中AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2mRNA表达明显低于其他各组（P<0.05）。C组(注射脂联素10μg/kg·d-1)AdipoQ、AdipoR1及AdipoR2 m RNA在子宫内膜、卵巢及胚胎组织表达显著高于B组(注射脂联素1μg/kg·d-1)、D组(注射脂联素100μg/kg·d-1),差异有统计学意义（P<0.05）。D组AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2 mRNA在胚胎组织表达明显低于对照组（P<0.05）。结论:适当浓度外源性脂联素可增加PCOS小鼠脂联素及其受体1、2子宫内膜组织、卵巢组织及胚胎中的表达,有利于提高PCOS小鼠受孕率。高浓度外源性脂联素可降低脂联素及其受体1、2在PCOS小鼠子宫内膜组织、卵巢组织及胚胎中表达,从而降低PCOS小鼠受孕率。更多还原

关 键 词： 多囊卵巢综合征 [1491641]脂联素 [1491668]脂联素受体 [3522158]子宫内膜 [4555019]卵巢 [2874142]胚胎

分 类 号： [R711.75]

领　　域： []