导　　师： 林春水

授予学位： 博士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 研究背景:　　肢体远端缺血预处理(Remote ischemic preconditioning，RIPC)通过短暂、亚致死性的远端肢体缺血再灌注，启动内源性保护机制，可有效诱导脑缺血耐受，减轻后续脑缺血再灌注损伤(I/R)，改善缺血性脑卒中患者的预后。由于RIPC具有安全、无创、有效、简便等特点，而被认为是具有较好临床转化前景的一种预处理方式，对缺血或炎症相关的急性、亚急性及慢性神经系统疾病有较好的应用前景。研究表明，RIPC的远端器官保护机制可能与体液循环、外周传入神经及自主神经的传导、免疫以及一系列分子和通路相关。但RIPC抗脑缺血神经保护作用的确切机制比较复杂，尚不明确。阐明RIPC诱导脑缺血耐受的机制，对脑卒中及其他脑缺血性疾病的治疗具有重要的理论和实践价值。我们的前期研究发现，脑缺血预处理(cerebral ischemic preconditioning，CIP)可激活缺血脑区Notch1介导抗脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。本研究旨在探讨RIPC能否通过激活缺血脑区Notch1信号，产生抗脑缺血再灌注损伤的神经保护作用，阐明Notch1及NF-κB信号通路在RIPC诱导的脑缺血耐受中的作用。　　实验方法:　　采用SD大鼠的大脑中动脉栓塞/再灌注(MCAO/R)模型和原代海马神经元细胞的糖氧剥夺/复糖复氧(OGD/R)模型分别模拟I/R损伤的体内及体外模型。RIPC在MCAO损伤前72h开始，连续三天，每天5min*4次左下肢缺血/再灌注。采用侧脑室注射通路抑制剂DAPT和sh-Notch1慢病毒干扰技术以分别抑制体内和体外实验中Notch1通路的信号传导。再灌注24小时后，评估神经功能缺损评分;TTC染色法检测脑梗死体积;Tunel/NeuN免疫荧光双标及AnnexinⅤ-FITC/PI流式细胞术检测神经细胞凋亡;CCK-8法检测神经元细胞活力;Westernblot检测Notch1及NF-κB通路相关蛋白NICD、Hes1、p-Ikkα/β、p-NF-κBp65及Bcl-2，Bax的表达水平�

关 键 词： 脑缺血再灌注损伤 肢体远端缺血预处理 信号通路 神经保护