导　　师： 姜子德;李敏慧

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 尖孢镰刀菌古巴专化型[Fusarium oxysporum Schlecht. f. sp. cubense(E.F. Smith) W.C. Snyder et H.N. Hansen]引致的香蕉枯萎病是世界性的香蕉毁灭性病害。近年来，毒性较强的4号小种蔓延日益严重，尚缺乏十分有效的防治措施，使香蕉产业面临更加严峻的挑战。通过研究香蕉枯萎病菌的致病相关基因不仅增加人们对其致病机理的了解，而且还可为发展新的防治策略提供理论依据。　　以本实验室在前期研究中筛选到一个香蕉枯萎病菌4号生理小种致病力减弱的插入突变体W2987为基础，该突变体的T-DNA插入位点位于两个基因的中间。因此为了弄清这两个基因的功能，本研究分别克隆了T-DN A插入可能影响的基因FOIG_01729和FOIG_01730;通过对该两个基因的敲除、突变体表型分析及致病力检测，分析了香蕉枯萎病菌FOIG_01729和FOIG_01730两个基因与致病力相关的功能，主要结果如下：　　1. NCBI数据库比对以及聚类分析表明，FOIG_01729基因编码的蛋白与两个尖孢镰刀菌的假定蛋白有极高的同源性，与镰刀菌相应的同源蛋白聚在同一分支，但在其他种物种中均无法找到同源蛋白，说明FOIG_01729是个新基因且在镰刀菌中相对保守;FOIG_01730基因编码的蛋白与其他镰刀菌的假定蛋白紧密地聚在一支，虽然在脉孢菌和黄曲霉菌中也比对到同源蛋白，但相似率极低，在其他种物种中均无法找到同源蛋白，说明FOIG_01730是个新基因且在镰刀菌中是保守的。　　2.应用 PEG介导的原生质体转化法，分别对目标基因 FOIG_01729和FOIG_01730进行了敲除，经PCR和Southren杂交检测验证所得的转化子是正确的FOIG_01729和FOIG_01730基因敲除突变体。qRT-PCR对获得的敲除突变体进行FOIG_01729和FOIG_01730目标基因的表达量分析表明，敲除突变体中均检测不到目标基因的表达。　　3. FOIG_01729基因敲除突变体的菌落形态、生�

关 键 词： 香蕉枯萎病菌 致病基因 防治策略 基因敲除

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