导　　师： 毛华

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 第一部分血清外泌体miR-21、miR-92a在在结直肠癌患者的表达情况目的MiR-21是一种原癌基因,在人类多种肿瘤中异常表达,近年研究表明大肠癌患者癌组织和血浆中miR-21表达均升高,也有研究发现miR-92a在血浆和粪便中表达上调,并且这两种miRNAs在肠癌癌前病变大肠腺瘤中均出现异常表达。外泌体是一种纳米级膜性囊泡样结构,在肿瘤微环境中分泌明显增多,其膜状结构可以很好的保护miRNAs避免血清中RNA酶的降解。本研究拟利用相对定量PCR方法,检测血清外泌体中miR-21、miR-92a在结直肠癌患者的表达情况,并探讨联合两者检测诊断结直肠癌的临床价值。方法1、采集外周血标本:结直肠癌患者70例,大肠腺瘤组45例,健康对照组60例;2、采用超速过滤方法提取血清中外泌体并用透射电镜方法进行鉴定。应用实时荧光定量PCR检测标本中miR-21和miR-92a的表达;3、计算miRNA的表达水平,应用SPSS21.0软件进行统计分析,计量资料以(x±s)表示,组间均值比较比较采用单因素方差法分析;通过ROC曲线分析评估血清外泌体miR-21、miR-92a在结直肠癌诊断中的价值。以P<0.05为差异有统计学意义。结果1、结直肠癌患者血清外泌体miR-21、miR-92a表达水平均高于健康对照组,差异有具有统计学意义(P<0.05);大肠腺瘤患者血清外泌体miR-21、miR-92a表达水平均高于健康对照组,差异有具有统计学意义(P<0.05);结直肠癌组与大肠腺瘤组比较,血清外泌体miR-21、miR-92a表达水平差异无统计学意义(P>0.05);2、对70例结直肠癌患者行ROC曲线分析,血清miR-21、miR-92a以及两者联合检测ROC的AUC分别为0.86、0.87、0.93,血清外泌体miR-21、miR-92a的灵敏度分别为83.6%、70.9%,特异度分别为81.4%、86.4%。而联合检测miR-21、miR-92a灵敏度可提高至85.5%,特异度可达88.1%;与癌胚抗原CEA相比,联合检测血清exomalmiR-21、miR-92a的AUC、特异性和敏感度均升高。3、对45例大肠腺瘤患者行ROC曲线分析,血清miR-21、miR-92a以及两者联合检测ROC的AUC分别为0.82、0.82、0.87,血清外泌体miR-21、miR-92a及联合检测的灵敏度分别为75.6%、81.8%、83.6%,特异度分别为81.4%、86.7%。、84.4%。结论1、血清外泌体miR-21、miR-92a在结直肠癌组、大肠腺瘤组表达水平均高于高于健康对照组,差异均有统计学意义;在结直肠癌组与大肠腺瘤组之间比较,差异无统计学意义;2、联合检测血清外泌体miR-21、miR-92a诊断结直肠癌的AUC、灵敏度、特异度均比单独检测的高;联合检测血清外泌体miR-21、miR-92aL比癌胚抗原用于结直肠癌诊断的AUC高;3、联合检测血清外泌体miR-21、miR-92a诊断大肠腺瘤的AUC、灵敏度均比单独检测的高。第二部分血清外泌体miR-21、miR-92a与结直肠癌患者临床病理特征之间的关系目的有研究提出miR-21、miR-92a表达上调可能与大肠癌临床分期、淋巴结转移、预后差等相关,但结论尚不一致。本研究第一部分已证明结直肠癌患者血清外泌体miR-21、miR-92a表达水平高于健康对照组,这部分旨在更深入的探讨血清外泌体miR-21、miR-92a与结直肠癌患者临床病理特征、判断预后的关系。方法完善结直肠癌患者的临床病理资料,包括CEA水平、肿瘤分化程度、肿瘤类型、肿瘤部位、浸润层次、淋巴结转移、远处转移、TNM分期(AJCC第7版);分析外泌体miR-21、miR-92a与临床病理特征的关系。应用SPSS21.0软件进行统计分析,结直肠癌患者临床特征参数与血清中miR-21、miR-92a表达水平的相关性采用Spearman法分析。以P<0.05为差异有统计学意义。结果血清外泌体中miR-21与肝转移(P=0.023)相关,miR-92a水平与TNM分期(P=0.045)、肿瘤分化程度(P=0.002、)、脉管侵犯(P=0.007)、淋巴结转移(P=0.045)相关。miR-21、miR-92a表达情况与与性别、年龄、CEA水平、肿瘤部位、肿瘤病理类型、肿瘤浸润深度均无关系(P>0.05)。结论血清外泌体中miR-21与结直肠癌患者肝转移相关;miR-92a与结直肠癌患者的TNM分期、肿瘤分化程度、静脉浸润以及淋巴结转移相关,提示外泌体miR-21和miR-92a可能用于结直肠癌病情评估与预后判断。更多还原

关 键 词： [4919540]结直肠癌 [3774015]外泌体 [8697670]MIR-21 miR-92a 诊断 [4433119]临床病理特征

分 类 号： [R58 R73]

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