导　　师： 林炜铁;朱兴江

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 华南理工大学

摘　　要： 微藻生物柴油是重要的第三代生物质能源。许多研究者通过各种方法致力于提高藻细胞油脂产量。重碳酸盐作为一种无机碳源,其使用不仅可以促进藻细胞生长,还可用于室外培养微藻。本研究以重碳酸盐为外加碳源培养微藻来研究微藻油脂产量;与此同时分析了藻细胞对高盐度高碳酸氢盐浓度条件的耐受性,并研究了室外培养微藻时高盐度和高碳酸氢盐浓度条件对细菌生长的抑制效果;除此之外,我们设计了一种碳酸氢盐与稀释尿液偶联的微藻培养方法,探讨低成本下室外培养微藻的可能性。本研究主要内容及结果如下:1.从购买的Nannochloropsis sp.GY-H14中筛选分离纯化出一株微藻LPF,18S基因测序及藻株系统发育树结果表明该藻与小球藻属亲缘关系最近。Chlorella sp.LPF是一株海洋微藻,更适合在f/2培养基中生长,通过优化微藻培养条件得知,Chlorella sp.LPF的最适生长环境条件为:温度25℃,培养基盐度20‰,初始pH8.0。2.碳酸氢盐的使用显著促进了Chlorella sp.LPF油脂积累。当HCO浓度100mM,氮源浓度为1mM时,小球藻在氨氮、硝氮、尿素培养基中油脂百分比达到最高,分别为55.0%,41.9%和42.1%,与此对应的油脂产量分别为284,249和270 mg/L;脂肪酸组成分析结果表明知,不同氮源条件下藻细胞油脂脂肪酸成分存在较大差异;细胞营养成分变化分析(包括淀粉、蛋白质、油脂、叶绿素),胞内油脂观察和功能酶基因(包括碳固定、氮同化、油脂合成基因)相对表达量结果证实了碳酸氢盐可以促进藻细胞生长和油脂积累。3.Chlorella sp.LPF盐度耐受性约为40‰,该盐度下可耐受900mM碳酸氢钠。以该盐度与碳酸氢盐浓度为条件用珠江水、自来水、自然湖水培养微藻发现,该条件对水体中细菌有一定抑制作用。4.稀释尿液培养基可以显著促进微藻生物量的积累,却不能有效促进油脂积累。而培养基中碳酸氢

关 键 词： 碳酸氢盐 油脂积累 盐度 尿液

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