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β-细辛醚对Glu损伤PC12细胞的保护及其对NMDAR亚型表达影响

导  师: 江湧

授予学位: 硕士

作  者: ();

机构地区: 广州中医药大学

摘  要: 目的:  探讨β-细辛醚对谷氨酸引起PC12细胞损伤的保护作用以及NMDA受体亚型和突触素表达的影响。  方法:  PC12细胞分为正常组,模型组和治疗组组,正常组用无血清DMEM培养基培养,模型组用含50mM谷氨酸的无血清DMEM培养,治疗组用10μM的β-细辛醚与含50mM谷氨酸的无血清DMEM培养共同培养,2h后观察电子显微镜下细胞形态,用cck-8检测其活力;采用流式细胞术检测细胞内Ca2+、线粒体膜电位(MMP)、细胞凋亡等的变化。免疫荧光技术检测突触素(SYP)在各组细胞中的表达,并用PCR扩增技术对其细胞内NMDA受体亚型的基因(NR1,NR2A,NR2B,NR2C,NR2D,NR3A,NR3B) mRNA的表达进行分析。  结果:  经谷氨酸损伤的PC12细胞与正常培养的细胞相比,活力明显低于正长培养组细胞(P<0.01)。与治疗组比,治疗组明显活力高于模型组(P<0.01),与正常组比,正常组活力高于治疗组。通过流式分析,模型组的细胞内Ca2+浓度与正常组细胞内Ca2+浓度相比,明显高于正常组(P<0.01);与治疗组相比,细胞内Ca2+浓度略高于治疗组(P<0.05);与正常组比,治疗组Ca2+浓度无统计学意义(P>0.05)。模型组线粒体膜电位与正常组相比,明显低于正常组(P<0.01);与治疗组比,略低与治疗组(P<0.05);与正常组比,正常组线粒体膜电位高于治疗组(P<0.01)。模型组的细胞凋亡率与正常组比,明显高于正常组(P<0.01);与治疗组相比,略高于治疗组(P<0.05);与正常组比,正常组凋亡率低于治疗组(P<0.01)。通过免疫荧光技术,与正常组比,模型组细胞中SYP荧光强度明显弱于正常组(P<0.01),与治疗组比,治疗组SYP荧光强度强于模型组(P<0.05),正常组SYP阳性细胞数相比与模型组增多(P<0.01),SYP阳性细胞数与模型组比较多(P<0.05);与正常组比,治疗

关 键 词: 亚型表达 损伤 细胞 细辛醚

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