导　　师： 徐领会

授予学位： 博士

作　　者： (）;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）又称为绿脓杆菌,属于革兰氏阴性菌,是一种条件性致病菌,它能感染人类、动物和植物。环二鸟苷酸（Cyclic diguanylate monophosphate,c-di-GMP）是细菌胞内第二信使小分子,调控诸多生物学功能,包括运动性、胞外多糖的分泌、致病因子的产生和生活方式由浮游自由个体向生物被膜状态的转变等。信号分子c-di-GMP通过结合多类受体调控细菌的生物学功能,目前已发现的受体包括转录调控因子,核糖开关等。其中含Pil Z结构域的蛋白是目前已知最大的一类c-di-GMP受体蛋白。然而,目前人们对Pil Z结构域蛋白功能及调控分子机制的了解非常有限。铜绿假单胞菌编码8个含有Pil Z结构域的c-di-GMP受体,其中包括4个功能未知单一结构域蛋白。我们以铜绿假单胞菌单一结构域Pil Z蛋白（PA0012,PA4324,PA4608,PA2799）为研究对象,系统研究这些蛋白致病相关生物学功能并对其中PA4608可能的致病机制进行了深入分析,研究结果将进一步深入我们对于c-di-GMP信号通路调控铜绿假单胞菌致病机理的了解。本论文中第一部分,我们首先利用同源重组的方法对编码具有保守c-di-GMP结合位点的四个单Pil Z结构域蛋白的基因进行了敲除,得到敲除突变体菌株ΔPA0012,ΔPA2799（hap Z）,ΔPA4324,ΔPA4608（map Z）,随后,以野生型菌株PAO1为对照,用这四个突变体进行了表型筛选。我们发现这4个单Pil Z结构域蛋白的突变导致铜绿假单胞菌的多种表型变化并不相同,表明这些蛋白可能调控各异的信号通路,比如群集运动能力,感染生菜的能力,对线虫的致病力和生物膜形成方式等。在转录水平上四个单Pil Z结构域蛋白突变导致的差异基因也各不相同,我们对这四个突变体和野生型菌株进行了RNA测序实验,经过分析的数据显示,相比较于野生型菌株,单Pil Z蛋白的缺失可能导致大量基因的差异�

关 键 词： 铜绿假单胞菌 结构域 受体 致病性 生物学功能