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荔枝果实发育过程中ABA代谢关键酶基因的筛选

导  师: 胡桂兵

授予学位: 硕士

作  者: ();

机构地区: 华南农业大学

摘  要: 荔枝(Litchi chinensis Sonn.)为无患子科(Sapindaceae)荔枝属(Litchi)常绿果树,在我国南方亚热带地区广泛栽培。荔枝属于非呼吸跃变型果实,生长发育大致需要70-120天,可主要划分为以果皮、种皮生长为主及以假种皮、胚生长为主的两个时期。近年来,脱落酸(Abscisic acid,ABA)在跃变型及非跃变型果实的生长发育及成熟衰老过程的重要作用逐渐被人们所探知,高等植物组织中内源ABA的含量一直处于动态平衡的状态中,是其生物合成、分解及活化再生等因素共同作用的结果,在此过程中相关基因的表达水平和酶活性起着关键作用。本研究利用同源比对获得荔枝中NCED、CYP707A、BG家族候选基因,分析其基因与推导蛋白序列特征,并将基因表达趋势与果实发育过程ABA含量变化结合研究,得到‘妃子笑’荔枝果实内调控ABA生物合成、分解及活化再生的关键酶基因,并通过病毒诱导基因沉默及基因瞬时表达验证实验进一步探究LcNCED对于ABA生物合成的调控作用,可得到以下主要结果:1、果实发育过程中ABA含量测定结果显示,果皮内ABA含量在盛花后(Days After Flowering,DAF)20 d出现峰值后开始下降,在DAF40 d时有稍许回升,后继续下降,于DAF60 d时重新升高;果肉内ABA含量一直随着果实发育进程的推进而逐渐增加,在DAF55 d达到顶峰,随后下降;种子内ABA含量在DAF20 d、40 d、60 d出现明显的峰值。2、从荔枝基因组库中初筛得到8个ABA代谢关键酶基因的候选基因,包括3个LcNCEDs、4个LcCYP707As、1个LcBGs。3、根据生物信息学分析结果,LcNCEDs编码氨基酸个数分别为598、596、601,亚细胞定位预测均具有叶绿体转运肽而不含信号肽,定位于叶绿体上,均包含跨膜螺旋结构,推测为跨膜蛋白,进化树分析显示LcNCEDs与其他物种NCED高度同源,证明所筛选LcNCEDs为NCED家族成员。LcCYP707As编码氨基酸个数分别为466、434、443、471,保守结�

关 键 词: 荔枝 果实发育 脱落酸 基因表达

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