导　　师： 王翀

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 骨骼肌对于运动、姿势支撑、呼吸和产热等重要生物学功能的行使至关重要。骨骼肌是人体的最大器官（按质量计）,占健康个体的质量约40%。骨骼肌纤维含有肌节,它们的一致收缩可以产生机体日常生活运动所需的力量。卫星细胞在一般情况下处于静止状态,机体受到损伤后会被激活成成肌细胞,它对骨骼肌的生长发育以及损伤修复具有重要作用。所以,对骨骼肌卫星细胞的研究具有重要的实际意义。C2C12细胞是小鼠成肌细胞系,可以被广泛用于对成肌分化过程的研究。mi RNA是短链的非编码RNA,可通过调控其靶基因的表达发挥重要功能。已经有研究表明mi R-501-3p在癌症等疾病中具有重要的作用,且大量研究表明mi R-501-3p能够调控细胞增殖、分化和迁移。然而,关于mi R-501-3p在C2C12增殖分化迁移期的作用知之甚少。本研究通过过表达和干扰mi R-501-3p,研究其对C2C12细胞增殖、分化、迁移的作用,采用生物信息学方法预测其靶基因,验证靶向关系后构建靶基因过表达载体,在C2C12细胞中过表达和干扰靶基因,研究靶基因功能,并在C2C12细胞中完成功能回复验证。主要研究结果如下:1、mi R-501-3p对C2C12细胞增殖的影响分别过表达和干扰mi R-501-3p后24 h,通过Ed U法和流式细胞术检测C2C12细胞增殖,结果显示mi R-501-3p能够抑制C2C12细胞增殖。q RT-PCR和Western blot结果显示,mi R-501-3p在m RNA水平和蛋白水平能够抑制CCNA的表达、上调CCNB的表达。综上,mi R-501-3p能够通过抑制CCNA的表达促进CCNB的表达（P<0.01）从而抑制C2C12细胞增殖。2、mi R-501-3p对C2C12细胞分化的影响分别过表达和干扰mi R-501-3p后,待C2C12细胞达到90%左右汇合后,诱导其分化,分别于诱导分化3 d、5 d进行Myosin免疫荧光,q RT-PCR和Western blot检测Myo G和Myosin的表达水平。结果显示,mi R-501-3p能够通过促进Myo G、Myosin的相对m RNA水平和蛋白�

关 键 词： 靶向 调控 细胞 增殖分化