导 师: 张学武
授予学位: 硕士
作 者: ();
机构地区: 华南理工大学
摘 要: 螺旋藻具有丰富的营养与药用价值,国内外对螺旋藻与螺旋藻蛋白的生物活性如抗氧化、抗菌、抗肿瘤等进行了广泛的研究,本文对其多肽的降血糖活性进行了研究,进一步拓展了螺旋藻的应用价值。本文以螺旋藻粉为原料,采用超声耦合亚临界水法提取螺旋藻粗蛋白/多肽,与反复冻融和超声均质联用法获得的螺旋藻粗蛋白/多肽进行了对比。系统研究了温度、超声功率、压力、时间等因素对提取率的影响规律,并建立了响应面数学模型。通过测定不同提取温度下获得的螺旋藻粗蛋白/多肽的抗氧化与降血糖活性,筛选得到活性较好的组分,利用分析型HPLC对其分子量进行测定,通过制备型HPLC对其进行分离纯化,采用质谱技术得到多肽序列,结合Peptide Ranker与pepATTRACT对获得的多肽进行生物活性的预测,筛选出综合排名前三的肽序列进行合成并验证其降血糖活性。本文的主要研究成果如下:1)对亚临界水提取设备中的提取釜结构进行改进,增加了原料与亚临界水的接触面积,蛋白/多肽提取率由10.30%显著提高至40.20%(p<0.01);四个因素对提取率的影响主次顺序为:温度>超声功率>提取时间>压力。建立的响应面数学模型,以提取率为响应值,以温度、超声功率、时间为因子,得出提取蛋白/多肽的最佳条件为:温度153℃,超声功率221W,提取时间64min,压力10MPa,经验证实验得蛋白/多肽提取率为74.02%。而反复冻融与超声均质联用法蛋白/多肽质提取率为45.76%。由此可见,超声耦合亚临界水法更优。2)采用ABTS、DPPH、羟基自由基清除率法评价螺旋藻粗蛋白/多肽的抗氧化能力。结果表明:通过超声耦合亚临界水提取获得的螺旋藻蛋白/多肽在010mg/mL的实验剂量范围内均具有较强的抗氧化活性,且明显大于超声均质与反复冻融联用提取的蛋白/多肽。3)通过评价螺旋藻粗蛋白/多肽对α-淀粉酶
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