导　　师： 李奇

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 背景:磨损颗粒诱导的骨溶解是关节假体无菌性松动的主要原因。参与这一复杂生物学效应的细胞包括巨噬细胞、破骨细胞、骨(成骨)细胞、滑膜成纤维样细胞(fibro-like synoviocytes FLSs)、淋巴细胞等。颗粒引起的慢性炎症反应,导致假体周围组织内巨噬细胞聚集,趋化因子,细胞因子等释放最终激活RANKL-OPG信号通路并诱导破骨细胞分化成熟造成骨的吸收是假体松动的发生的研究共识。假体周围组织长期处于相对缺氧状态,HIF-1α的表达对细胞缺氧耐受的建立至关重要。有研究表明HIF-1α的表达骨发育及骨折愈合中血管长入也起着重要的促进作用。我们前期通过免疫组织化学染色发现界膜中大量的RANKL、OPG以及HIF-1α的表达,推测界膜中HIF-1α与RANKL-OPG信号通路存在相互作用,并与假体无菌性松动密切相关。目的:建立体外关节假体无菌性松动界膜的滑膜成纤维样细胞模型。研究钛金属颗粒诱导松动界膜中滑膜成纤维样细胞HIF-1α表达和RANKL/OPG信号通路活化情况及两者的相关性,探究HIF-1α与RANKL-OPG信号通路在假体无菌性松动中的作用。方法:收集健康成人的滑膜组织,分离提取人滑膜成纤维样细胞,流式细胞技术检测滑膜成纤维样细胞纯度,并与钛金属颗粒共培养模拟体内松动界膜中细胞的生存环境,建立体外细胞模型,MTT法检测细胞活性和增殖情况,验证模型可行性。QRT-PCR、Western blotting检测不同浓度梯度和刺激时间的钛金属颗粒刺激下,FLSs细胞RANKL、OPG、HIF-1α的mRNA和蛋白表达情况。结果:钛颗粒可以促进滑膜成纤维样细胞增殖。随钛颗粒浓度增加,RANKL/OPG和HIF-1α的蛋白和mRNA水平均呈递增趋势;随钛颗粒刺激时间增加,RANKL/OPG的蛋白和mRNA水平先增高后降低,HIF-1α则呈递增趋势。结论:钛金属颗粒刺激可以诱导滑膜成纤维样细胞增殖;钛金属颗粒可以诱导滑膜成纤维细胞HIF-1α表达增高和RANKL/OPG的比值增高;HIF-1α的表达增高可能对钛颗粒介导的界膜中滑膜成纤维样细胞RANKL/OPG信号通路活化存在抑制作用,从而对假体周围组织中破骨细胞的活化产生的溶骨作用存在一定的抑制效应。除了改进假体减少磨损颗粒的产生、抑制炎症反应等策略外,HIF-1α信号通路的激活可能通过增强局部组织修复同时调节骨代谢继而延缓松动发生,可能成为的另一个治疗策略和药物靶点。更多还原

关 键 词： [3984894]无菌性松动 [5464653]滑膜成纤维细胞 HIF-1α [7679413]RANKL/OPG [3719951]钛颗粒

分 类 号： [R687.4]

领　　域： []