导　　师： 刘雅红

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 碳青霉烯类的抗生素因为抗菌谱广，杀菌能力强而得以在临床上大量地应用，而这也导致越来越多耐药菌株的产生。水解碳青霉烯类的灭活酶主要分为A、B、D三大类，其中B类碳青霉烯酶又被称为MBLs（金属β-内酰胺酶）简称金属酶，在不同的国家和地区均有报道，但在野生鸟类中检测报道比较少。通过进一步研究野生鸟类所携带的耐药细菌的时空分布，我们可以更好地评估鸟类在耐药菌或耐药基因的传播中所起的作用。　　本研究于2015-2016年从广州南沙湿地公园和大学城湾咀头湿地公园采集鸟类的粪便样品，前后采集3次，一共180份。在实验室对野鸟粪便样品进行细菌的分离鉴定，共分离出10株耐碳青霉烯类抗生素的大肠杆菌（CREC），经PCR扩增和测序，均携带blaNDM-5基因，未检测到blaOXA、blaKPC、blaVIM和blaIMP基因。采用二倍琼脂稀释法进行药物敏感性实验，检测10株菌分别对17种抗生素的敏感程度和耐药程度，显示对美罗培南、厄他培南、四环素、利福平、头孢噻肟、头孢他啶、头孢西丁、磺胺甲基异恶唑/甲氧苄氨嘧啶和氟苯尼考均耐药，呈多重性耐药，对妥布霉素、环丙沙星和磷霉素中介耐药，对阿米卡星、庆大霉素和氨曲南敏感。随后进行了PFGE的分型，使用XbaⅠ进行酶切，均酶切成功，且产生了几乎相同的图谱型。10株大肠杆菌均结合转移成功，经PCR筛选和药物敏感性实验，证实了blaNDM-5发生了转移。通过S1-PFGE和Southern杂交实验将得到的10株接合子进行质粒的定位，证实了blaNDM-5基因都定位在一种大小约为50kb的质粒上，有利于对耐药细菌和耐药基因的传播机制的研究和认识。野生鸟类活动范围广，迁徙距离长，很有可能通过携带耐药细菌在不同地区和国家快速扩散，导致耐药性大范围增加，给动物和人类的生存造成威胁。本实

关 键 词： 鸡病防治 碳青霉烯酶 兽医药理 大肠杆菌

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