导　　师： 汪求精

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 研究背景:颅内动脉瘤(Intracranial aneurysm,ICA)的治疗方法主要有血管内介入治疗和手术夹闭。弹簧圈栓塞后动脉瘤的复发率比手术夹闭高,其与动脉瘤囊增大、弹簧圈压缩及动脉瘤颈部内皮覆盖不全等因素有关。其中,瘤颈部内皮覆盖不全是动脉瘤复发的重要因素,瘤颈部若形成完整的内皮覆盖则有利于减少血流对瘤腔冲击,可明显降低复发的风险。有研究证实动脉瘤患者外周循环中内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)数量减少、功能下降。EPCs可分化为内皮细胞参与损伤血管的修复。血管生成素-1(Angiogenin-l,Ang-1)是一种可调节内皮祖细胞功能的分泌型糖蛋白。Ang-1可通过其受体Tie-2发挥作用,而Tie-2可在EPCs高度表达。激活Ang-1/Tie-2可增强EPCs迁移、分化及管腔形成等血管修复功能,而血清中Ang-1升高提示动脉瘤破裂引起的蛛网膜下腔出血患者预后良好。因此,过表达Ang-1基因也许可增强EPCs功能,促进动脉瘤修复过程。此外,前期研究中,我们发现EPCs可加速动脉瘤修复作用,动脉瘤腔内α-SMA阳性,提示瘤腔内存在平滑肌样细胞,但是仍未清楚其是否来源于EPCs。综上所述,本研究欲通过过表达Ang-1基因从而增强EPCs功能,经尾静脉注射过表达Ang-1基因的EPCs,观察其对动脉瘤腔和瘤颈部的修复作用及其在动脉瘤腔内的转归,有望为降低颅内动脉瘤栓塞术后的复发率提供理论基础。第一部分构建血管生成素-1基因修饰的EPCs及其在动脉瘤中的修复作用目的:构建血管生成素-1(Ang-1)基因修饰的EPCs,并验证其对动脉瘤修复效果。方法:EPCs分别转染携带Ang-1和NC基因的慢病毒,通过管腔形成、划痕及MTT实验检测过表达Ang-1对EPCs功能的影响。动脉瘤模型构建完成2周后取动脉瘤组织行HE染色、Masson染色及免疫荧光检测。结果:管腔形成、划痕及MTT实验发现Ang-1基因修饰EPCs可增强其成管、迁移及增殖能力。病理学检测发现Ang-1-EPCs可加速动脉瘤的修复。免疫荧光显示动脉瘤腔内存在平滑肌样细胞。结论:过表达Ang-1基因可增强EPCs的管腔形成、迁移及增殖能力,加速动脉瘤的修复。第二部分平滑肌细胞对EPCs分化的影响及EPCs在动脉瘤中的转归目的:探索平滑肌细胞(SMCs)是否可影响EPCs的分化及EPCs是否可分化为SMCs参与动脉瘤的修复。方法:RT-PCR检测与SMCs共培养后的EPCs中α-SMA,SM22α,CD31和vWF mRNA表达情况。向动脉瘤模型注射携带GFP的EPCs,术后14d及28d取动脉瘤组织行免疫荧光检测EPCs在动脉瘤内的转归。结果:RT-PCR结果示SMCs可增加EPCs中平滑肌特异性基因α-SMA和SM22α的表达量(P<0.05),降低vWF表达(P<0.05),但CD31表达量增加(P>0.05)。免疫荧光示动脉瘤腔内GFP及α-SMA双阳性。结论:SMCs可诱导EPCs向SMCs方向分化,EPCs可分化为SMCs参与动脉瘤的修复。更多还原

关 键 词： 颅内动脉瘤 [4859887]内皮祖细胞 [734256]血管生成素-1 复发 [2948103]平滑肌细胞 分化

分 类 号： [R743]

领　　域： []