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香蕉枯萎病菌4号小种分生孢子萌发早期分泌蛋白质组研究

导  师: 李云锋

授予学位: 硕士

作  者: ();

机构地区: 华南农业大学

摘  要: 香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f. sp. cub ense,Foc)引起的土传维管束系统性病害,是香蕉生产上最重要的病害之一,给香蕉产业造成了毁灭性破坏。根据危害香蕉品种的范围,可将香蕉枯萎病菌划分为4个小种,其中4号小种(Foc4)几乎能侵染所有香蕉品种,危害性最大。目前,对于香蕉枯萎病菌的致病机理尚不清楚。分泌蛋白作为Foc的一类致病因子,在Foc成功侵染香蕉的过程中起着重要作用。因此,开展Foc4分泌蛋白质的研究,有助于全面了解Foc4致病机理,为香蕉枯萎病的防治提供理论依据。  本研究通过体外模拟植物与病原菌互作,用香蕉组织提取物进行诱导,采用基于Label-free的蛋白质定量技术,开展了Foc4分生孢子萌发早期的分泌蛋白质差异表达研究;结合生物信息学技术,对Foc4差异表达分泌蛋白质进行了功能分析。取得的研究结果如下:  1、以香蕉组织提取物为诱导条件,开展了适合于分泌蛋白质组分析的Fo c4分生孢子萌发的培养基筛选和萌发阶段的观察。结果表明Foc4分生孢子在NCM-A4培养基(CM完全培养基中去除了所有有机氮源后,添加了4 g/L的天冬氨酸)中有较高的萌发率,且去除了外源蛋白质的干扰,适合于后续的Foc4分泌蛋白质组研究。在该培养基中,Foc4分生孢子的生长有3个典型阶段,即分生孢子膨大/芽管开始形成期、芽管伸长期、成熟菌丝形成期;其中,7 h和10 h分别为芽管萌发期和成熟菌丝形成期的关键时间点。  2、应用Lab e l-fre e技术,对诱导条件下Foc4分生孢子萌发2个关键时间点的分泌蛋白质差异表达进行了分析;共鉴定了743个差异表达的分泌蛋白质;其中,有167个为经典分泌蛋白(22.5%)、254个为非经典分泌蛋白(34.2%)、322个为未知分泌途径的分泌蛋白(43.3%)。  3、对各时�

关 键 词: 香蕉枯萎病 致病机理 尖孢镰刀菌古巴专化型 分泌蛋白质组 技术

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