导　　师： 郭丽琼

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 我国是水产养殖大国，但是随着养殖业的迅速发展和高密度集约化的增大，养殖病害频繁发生，养殖过程中抗生素滥用，导致细菌耐药性现象不断出现，寻找一种安全有效的抗生素替代物成为当务之急。芽孢杆菌能够产生多种抗菌物质，其抑菌机理与传统抗生素具有本质区别，不易产生耐药性，并且具有广谱的杀菌作用，将芽孢杆菌抗菌脂肽应用于水产养殖，不仅能够抵制水产致病菌的攻击，还能对水产动物的健康起到益生作用，提高其生长性能。为了改变野生菌株普遍存在的低产量现象，本研究对抗菌脂肽产生菌进行了出发菌株筛选、鉴定、发酵优化、筛选体系建立、诱变育种等研究，主要研究结果如下：　　（1）对实验室前期保存的一些芽孢杆菌进行抑菌活性筛选，挑选出两株抑菌效果最好的菌株P1和P6作为初始菌株，对两株初始菌株进行了形态特征、生理生化特征鉴定，结合分子生物学鉴定结果，将其归类为解淀粉芽孢杆菌。　　（2）对菌株发酵产脂肽的培养基和培养条件进行了优化，确定最终的培养条件为：培养基采用MSM培养基（蔗糖20 g，NH4NO32 g，KH2PO43 g，Na2HPO410 g，MgSO40.2 g，酵母膏0.2 g，CaCl20.7μg，MnSO41μg，一级水1 L），最佳培养条件为温度30℃，培养基pH天然，装液量80 mL，培养时间60 h，转速220 r/min，接种量5%，在最佳发酵条件下抑菌圈直径达到22 mm，比优化前提高了51.7%。　　（3）对发酵液的温度耐受性、酸碱耐受性、紫外照射耐受性以及不同提取方法进行了研究，结果表明发酵液经100℃处理30 min后残留活性仍有84.76%，pH耐受范围为3~9，经紫外照射3 h后抑菌活性仍保持在50%以上。抑菌谱实验结果表明，发酵液对15种水产致病菌均具有抑制作用甚至杀菌作用。　　（4）以提高脂肽产量为目标，对初始菌株P1和P6进行�

关 键 词： 水产制品 芽孢杆菌 抗菌脂肽 发酵液化 诱变育种

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