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文献详细Journal detailed

专一酶水解壳聚糖高效制备壳寡糖的研究

导  师: 张立彦

授予学位: 硕士

作  者: ();

机构地区: 华南理工大学

摘  要: 壳寡糖具有多种生物活性,其中聚合度为2-6的壳寡糖的生理活性尤其显著。由于壳聚糖其特殊的溶液性质及壳聚糖酶解作用特性的限制,目前水解生产壳寡糖的效率还是十分低下,因此探究如何高效生产壳寡糖具有重要意义。为了提高酶解效率及目标壳寡糖的得率,本文分别研究了高浓度壳聚糖溶液专一酶水解过程及其效率提升,及高浓度壳聚糖溶液的水解产物的分离纯化工艺,并将高浓度壳聚糖溶液酶解和分离纯化相结合。最后还探讨了壳聚糖水解产物的微波真空干燥工艺。研究结果如下:1.对不同浓度的壳聚糖酶水解过程中的还原糖及壳寡糖变化进行测定,结果发现随壳聚糖浓度增加,还原糖转化率减小,8%的壳聚糖溶液的最终还原糖转化率仅为39.8%,2~6聚合度壳寡糖的得率仅为50%左右。2.考察底物浓度对高浓度壳聚糖溶液酶解效果的影响,结果发现当壳聚糖底物浓度较低时反应初速度随底物浓度的增加急剧增加,当底物浓度上升,反应初速度逐渐趋于平缓,随后随底物浓度继续升高而下降。通过在水解时间4 h或10 h时补加壳聚糖,最终还原糖浓度有所提高,但是此时目标壳寡糖的得率有所下降,分别为45.58%和46.68%,而且反应周期更长,不利于实际生产。3.考察高浓度壳聚糖溶液水解过程中的产物抑制,结果发现通过程序加入壳聚糖酶可以有效促进壳聚糖进一步降解,且酶量补加得越多水解液中还原糖含量越多。4 h和8 h分别补加酶5 U/g壳聚糖可使还原糖的转化率大大提高,最终产物的平均分子量更小,目标聚合度的壳寡糖的得率提高至75.10%,而且生理活性最高的壳五糖和壳六糖含量也大幅度提高。综合多次补加壳聚糖胶体及程序添加壳聚糖酶的研究结果,推理认为高浓度壳聚糖在壳聚糖酶水解过程中由于酶-底物复合物的形成使得酶解效率下降,底物抑制作用明显,�

关 键 词: 壳聚糖 壳聚糖酶 酶解效率 壳寡糖得率 超滤 微波真空干燥

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