导　　师： 赵肃清

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 广东工业大学

摘　　要： 慢性牙周炎是一种常见的慢性牙周疾病,而侵袭性牙周炎不同于慢性牙周炎,是一种快速急性发展的牙周疾病。虽然牙周炎并不致命,但可能会引起刷牙出血、牙齿松动、牙齿移位和口腔异味等现象,影响患者的生活质量。目前主流的治疗方法是基础治疗和抗生素联合使用,但抗生素滥用导致耐药菌株的出现已经成为一个全球性的问题,一旦停止用药,致病菌会重新定植在口腔。近年来,卵黄抗体广泛应用于预防和治疗由细菌、病毒或真菌等微生物引起的疾病。本文制备一种同时抗牙龈卟啉单胞菌和伴放线聚集杆菌的卵黄抗体,评价其生物活性,制作成为合适的剂型,为防治牙周疾病探索新方法。血平板琼脂培养基上观察牙龈卟啉单胞菌和伴放线聚集杆菌的菌落特征,用革兰氏染色、扫描电镜和透射电镜观察细菌形态特征。用二株牙周炎致病菌免疫产蛋母鸡,收集鸡蛋蛋黄液,通过水稀释法或聚乙二醇6000沉淀法提取卵黄抗体,使用硫酸铵盐析或硫酸钠盐析提纯卵黄抗体。提取物中蛋白质的含量用考马斯亮蓝染色法检测,卵黄抗体的相对分子量和纯度使用SDS-PAGE分析,采用ELISA检测卵黄抗体的效价和交叉反应,间接免疫荧光和蛋白质免疫印迹实验分析卵黄抗体的特异性,结晶紫染色定量法检测特异性卵黄抗体对牙龈卟啉单胞菌和伴放线聚集杆菌生物被膜形成的抑制作用。通过免疫电镜和共凝集实验分析卵黄抗体可能的作用机制。最后探讨卵黄抗体在漱口水中的稳定性。结果表明细菌的菌落特征和形态符合报道。水提取或聚乙二醇提取卵黄抗体的方法可行,其中聚乙二醇提取法提取的复合型卵黄抗体效价高,对牙龈卟啉单胞菌的效价峰值为1:10240,对伴放线聚集杆菌的效价峰值为1:5120,在初次免疫后的48天达到效价峰值,持续15天,与14株其他种属细菌的交叉反应性较�

关 键 词： 卵黄抗体 牙龈卟啉单胞菌 伴放线聚集杆菌

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