导　　师： 王修启

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： CDX2（Caudal type homeobox transcription factor2, CDX2）是肠道上皮特异性转录因子，可通过调节基因表达调控肠道上皮细胞增殖和分化。为研究 C DX2对猪肠道上皮细胞增殖的影响，本试验首先以转染空质粒的IPEC-J2（porcine jejunal eptithelial cells）和CDX2过表达IPEC-J2为模型，运用细胞计数、MTT检测CDX2过表达对细胞增殖的影响;后以野生型IPEC-J2为模型，设计并合成CDX2 RNA干扰序列，检测CDX2干扰对细胞增殖的影响;最后以CDX2过表达IPEC-J2细胞株为对照，选用mTOR和Wnt信号通路特异性抑制剂雷帕霉素（Rapamycin）和XAV939，分别进行单独及联合抑制处理，检测两个信号通路在 C DX2促进细胞增殖过程中的作用。最后采用Western blot技术，分析CDX2和抑制剂处理对mTOR和Wnt信号通路关键蛋白表达的影响。为全面解析仔猪肠道C DX2基因的功能特点奠定基础。　　试验结果如下：　　（1）CDX2过表达可显著促进细胞增殖（P<0.05），CDX2干扰可显著抑制细胞增殖（P<0.05）。　　（2）CDX2过表达可显著上调mTOR和Wnt信号通路关键蛋白的表达水平（P<0.05）;CDX2 RNA干扰可显著下调mTOR和Wnt信号通路关键蛋白的表达水平（P<0.05）。　　（3）mTOR和Wnt信号通路特异性抑制剂Rapamycin和XAV939显著抑制CDX2过表达细胞的增殖（P<0.05），两种抑制剂联合处理可进一步抑制细胞增殖（P<0.05）。　　（4）XAV939、Rapamycin以及二者联合处理都可显著抑制 mTOR信号通路、Wnt信号通路以及CDX2的蛋白质表达（P<0.05）。　　结论：（1）CDX2可通过激活mTOR和Wnt信号通路促进猪肠道上皮细胞增殖;（2）mTOR和Wnt信号通路均参与调节CDX2合成。

关 键 词： 猪 肠道上皮细胞 细胞增殖 尾型同源核 转录因子

领　　域： []