导　　师： 王颖芳

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 广东药科大学

摘　　要： 目的：　　验证长白山人参水煎液中miRNA是否存在;验证空白组（正常大鼠）和处理组（灌胃人参水煎液）大鼠血液中人参 miRNA的表达变化;通过建立气虚疲劳大鼠模型，验证人参miRNA对其靶基因的影响。　　方法：　　1. 选用通用植物miRNA提取试剂盒法抽提人参水煎液miRNA，经琼脂糖凝胶、Agilent2100 Bioanalyzer检测其质量、纯度、完整性。并利用Illumina HiSeqTM2500测序仪对人参水煎液进行测序分析，预测其中是否存在已知miRNA以及新的miRNA，以及利用RT-qPCR技术验证已知miRNA。　　2. 6只大鼠分成2组（空白组和处理组），每组各3只，除正常组外，处理组灌胃2次/天，灌胃体积均为1ml/100g，连续给药30天。第31天，不给药，取各组血液，采用HiPure Liquid RNA/miRNA Kit试剂盒进行血液RNA的提取，利用RT-qPCR技术检测验证大鼠血液中含有的人参 miRNA，以及通过生物信息学方法将测序得到的人参煎液中miRNA比对大鼠进行靶基因分析筛选。　　3. 60只大鼠分成6组（人参水煎液组-R、去人参miRNA组-Q、人参miRNA组-M、人参皂苷组-Z、PBS组-P和空白组-K），每组10只，采用饮食失节+力竭游泳方法制造气虚疲劳大鼠模型，连续 20天。第 21 天，给药，不游泳，取各材，测血清 BUN、LDH 和肝糖原的含量。并观测各组药物对大鼠的影响，通过RT-qPCR验证人参miRNA是否影响气虚疲劳大鼠免疫基因的表达变化。　　结果：　　1.利用琼脂糖凝胶和Agilent2100 Bioanalyzer检测，人参水煎液能有效提取miRNA。通过测序，最终鉴定人参煎液有71个miRNA家族。利用RT-qPCR验证人参水煎液中miR159、miR167、miR396、miR166、miR168、miR156、miR165、miR162、miR394均存在并表达量降低。　　2. 利用 RT-qPCR 技术进一步地验证大鼠血液中确实存在人参miRNA，如miR159、miR167、miR393、miR156、miR8175、miR5072等。并通过靶基因预测的�

关 键 词： 人参 水煎液 气虚疲劳 动物实验

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