导　　师： 邹记兴

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 持久性有机污染物(Persistent organic pollutants, POPs)是指具有持久性、生物蓄积性、半挥发性、远距离迁移性、高毒性等特性污染的统称，包括二噁英和多环芳烃类（Polycyclic Aromatic Hydrocarbons, PAHs）等强致癌物质。POPs对环境的污染日益加重，不仅影响农产品尤其是水产品的质量安全以及社会可持续发展，而且直接影响人畜饮水，并严重威胁着人类健康，乃至生存。为此，如何快速、灵敏地监测环境中POPs的污染状况显得十分重要。本论文利用二噁英和PAHs可以激活芳香烃受体（Aryl hydrocarbon receptor，AHR）信号通路启动下游基因细胞色素 P4501A(Cytochrome P4501A, cyp1a)表达的特点，构建了一种通过 cyp1a启动子驱动红色荧光基因（mCherry）表达的Tg(cyp1a:mCherry)转基因斑马鱼（Barchydanio rerio var），利用该转基因荧光斑马鱼暴露于不同环境样品中，根据其荧光蛋白表达量的变化监测环境中二噁英、PAHs等POPs的含量和变化。同时应用截短的cyp1a启动子、Gal4/UAS系统、TALE-TF系统以及 CRISPR/Cas9基因编辑系统，进行提高转基因荧光斑马鱼对POPs检测灵敏度的相关研究。主要研究结果如下：　　1、通过巢式PCR扩增得到cyp1a启动子，其长度为2685bp，包括8个外源性化学物质调控元件（XRE）以及CAAT框和TATA框，双荧光素酶分析结果显示实验所得的启动子具有明显的2,3,7,8-四氯二苯并二噁英（2,3,7,8-Tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD）浓度依赖效应。　　2、利用巨核酸酶转基因系统，通过斑马鱼胚胎显微注射，最终筛选得到5个品系的转基因荧光斑马鱼，其中品系CM2和CM3对TCDD具有明显的浓度依赖效应。通过染色体步移技术和绝对荧光定量分析，品系 CM2具有两个拷贝，其中一个插入位点在4号染色体tspan11和sema3aa之间;品系CM3具有一个拷贝，插入位点在22号染色体elfn2a和mfng之间。　　3、通�

关 键 词： 细胞色素 转基因斑马鱼 持久性有机物 生物监测

领　　域： []