导　　师： 陆晓和

授予学位： 博士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 背景和目的：紫外线辐射(ultraviolet radiation，UVR)可引起急性损伤如日晒伤和慢性累积性损伤如光老化及皮肤癌，对人类健康存在潜在威胁，越来越引起人们的关注。角膜对高强度UVB(ultraviolet radiation B)所致损伤异常敏感，并可产生多种角膜病变，如翼状胬肉、气候性滴状角膜营养变性、急性电光性角膜炎（雪盲）、角膜上皮内瘤形成等其他眼病。富组蛋白1(Histatin1，Hst1)在唾液中普遍存在，主要作用为抗菌及抗真菌。已有研究提示该蛋白对某些非口腔细胞如人表皮细胞、人成纤维细胞等同样具有活化功能。本研究拟探讨Hst1对紫外线致人角膜上皮细胞光损伤的保护作用研究并初步分析其可能的作用机制。　　方法：通过不同辐射时间的UVB对人角膜上皮细胞(HCEC)进行光化学损伤，建立紫外线致HCEC光损伤细胞模型，并经不同浓度Hst1处理(10μg/ml，50μg/ml，100μg/ml)。通过阿尔玛蓝测定不同浓度Hst1处理下HCEC的增殖情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HCEC细胞SOD及MDA含量，MTT法检测HCEC存活率情况，通过流式细胞仪检测HCEC凋亡情况。荧光定量PCR技术检测HCEC中IGF-1、Bcl-2和Bax相对表达量，免疫印迹分析(Western Blot)检测HCEC中IGF-1、Bcl-2和Bax的表达水平。　　结果：研究发现紫外线辐射显著诱导HCEC凋亡，且紫外线处理2小时后细胞凋亡的百分率为31％，显著高于对照组细胞。紫外线辐射显著抑制HCEC存活率，紫外线辐射2小时后HCEC的存活率约为70％，显著低于对照组。选取紫外线辐射时间2小时，辐射量为0.144J/cm2，作为紫外线诱导的光损伤细胞模型的最佳剂量。采用三种浓度的（10μg/ml，50μg/ml，100μg/ml）Hst1处理HCEC，发现Hst1蛋白显著抑制HCEC凋亡并提高HCEC增殖能力，降低SOD表达水平，提高MDA含量，且50μg/ml Hst1为最佳作用浓度。Hst1处理提高HCEC中IGF-1及Bcl-2相对

关 键 词： 角膜上皮细胞 光化学损伤 紫外线辐射 富组蛋白 免疫机制

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