导　　师： 任娇艳

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 华南理工大学

摘　　要： 本文以药食同源植物葛根、蒲公英,可用于保健食品的中草药大蓟,可食用植物洋蓟、芹菜籽,以及苗药黑骨藤为原料,采用水提、醇提两种工艺进行天然成分提取,检测提取物的组成成分、抗氧化活性、体外黄嘌呤氧化酶(XO)抑制活性,并构建高尿酸细胞模型应用于所得产物降尿酸活性检测。以尿酸代谢酶为靶点,采用分子对接技术模拟评价小分子化合物的生物活性,计算小分子的分子描述符,以分子描述符为自变量,酶结合活性为因变量构建构效关系模型,可广泛用于降尿酸功能因子高效、快速地预测筛选。采用沸水浸提、乙醇浸提两种不同方式对六种天然植物原料进行功能成分提取,检测12种提取物中黄酮类、多酚类、多糖类、蛋白质类等活性成分的含量,发现活性成分含量与植物原料种类、提取工艺等参数密切相关。采用DPPH·清除率检测提取物的抗氧化活性,优化酶标仪法测定DPPH·清除率实验条件为:吸收波长517 nm、DPPH·浓度0.2 mg/m L、温度37°C、反应时间20 min,测得蒲公英水提物、醇提物均有较好的DPPH·清除活性,IC分别为0.45 mg/m L和0.46 mg/mL。测定提取物氧化自由基吸收能力(ORAC),葛根提取物具有最佳ORAC活性,葛根醇提物Trolox当量为55.06?mol/L,葛根水提物以31.69?mol/L次之。采用双酶偶联法测定植物功能成分的XO抑制活性,葛根醇提物的XO抑制活性显著高于其他提取物,IC为6.14 mg/mL。分析抗氧化活性与XO抑制活性相关性,发现DPPH·清除活性与XO抑制活性无线性相关性,而ORAC活性与XO抑制活性显著相关,Pearson系数为0.697。采用人肾小管上皮细胞(HK-2 cells)为造模细胞,腺苷为造模物质,构建高尿酸细胞模型。以高尿酸细胞模型检测12种提取物降尿酸活性,结果显示芹菜籽水提物、葛根醇提物与黑骨藤水提物表现出明显的降尿酸活性且具有剂量效应,芹菜籽水提物浓度4.0 mg/

关 键 词： 植物提取物 抗氧化活性 黄嘌呤氧化酶抑制活性 高尿酸细胞模型 分子对接 构效关系模型

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