导　　师： 刘吉平;廖森泰

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 僵蚕作为一种传统的中药材，具有降血糖、降血脂、抗惊厥、抗癌等多种药理作用。由于中药材僵蚕市场存在着假冒伪劣产品以次充好的现象，进而迫切需要建立一套快速鉴别中药材僵蚕真伪的方法，保障临床用药的安全。本研究对随机收集自广西、四川、安徽、浙江、江苏等产地的41个僵蚕样品作为实验材料，基于家蚕线粒体COXI基因，设计筛选了能够鉴别僵蚕中基原家蚕的引物;基于白僵菌线粒体全基因测序分析的基础上，选择rps3基因，及白僵菌广东株和黄僵菌线粒体基因差异序列差异区段，设计筛选了2对均能鉴别僵蚕中基原白僵菌的引物，基于白僵菌广东株rRNA序列，设计筛选了1对能够特异鉴别僵蚕表面真菌的引物，建立了一套基于基因组学对僵蚕真伪鉴别的分子鉴定方法。获得的主要结果如下：　　（1）基于NCBI中家蚕线粒体全基因组序列（登录号：AB070264.1）设计筛选了1对引物，可有效地鉴别出僵蚕中基原家蚕。通过基于家蚕线粒体COX1基因序列设计合成了10对引物分别对12个动物类样品进行PCR扩增测序及比较分析，筛选出了1对能有效鉴别家蚕的引物，扩增片段约为600 bp;并应用该引物对41个僵蚕样品进行了基原家蚕的PCR鉴别研究，发现其中1个样品（21号四川产地的僵蚕）没有目的扩增条带，而40个有目的扩增条带的样品经测序分析，与已发表的家蚕COXI基因序列对比相似度高达100%和99%。　　（2）完成了对白僵菌广东株和黄僵菌（白僵菌不同血清型）线粒体全基因组及白僵菌广东株rRNA全基因组的测序和分析，发现白僵菌广东株线粒体全基因组序列为29922 bp，GC含量为27.26%，获得的NCBI登录号为KU869769;而黄僵菌线粒体全基因组长为29915 bp，GC含量为27.20%，两者均含有42个编码基因（15个蛋白编码基因、25个tRNA、2个rRN A），黄僵菌�

关 键 词： 僵蚕 分子鉴定 线粒体 核糖体蛋白 质量标准

领　　域： []