导　　师： 焦培荣

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 自从2014年我国首次分离到H5N6亚型高致病性禽流感病毒以来，截止至2016年12月，我国在10个省份累计发生18起H5N6亚型禽流感疫情，对家禽产业造成严重损失，同时威胁着人类的公共卫生安全。2016年，在我国华南地区共分离到19株H5N6亚型禽流感病毒，并对这些分离株进行了全基因组测序，进而分析了他们的分子特性、遗传演化及对鸡的致病性。　　在本研究中，19株分离毒株的HA蛋白裂解位点均为RRRK R↓G，存在4个以上连续的碱性氨基酸，符合典型的H5亚型高致病性禽流感的分子特征。N A蛋白均出现58~68的颈部氨基酸缺失，潜在的神经氨酸酶抑制剂耐药性位点均未出现耐药性突变。对PB2蛋白推导的氨基酸序列分析发现，其627位均为E，具有典型禽源禽流感病毒的特征;所有毒株在701位均为D，没有发生突变。PB1，PA，NP，NS等蛋白发生部分变异。M2蛋白推导的氨基酸序列分析发现，其26位、30位和34位均未发生突变，6株病毒在第31位发生了S31N的突变，产生了对金刚烷胺药物的耐药性突变。　　本研究中19株 H5N6亚型禽流感病毒全基因组序列分子遗传演化分析发现，本研究毒株主要位于 GD-like、Eurasian lineage、EC-like、ZJ-like、VN2014-like、GD2016-like和Mix-like等不同的进化分支，其中GD-like是我国华南地区H5N6亚型禽流感病毒的优势进化分支，并且存在不同的基因型之间的基因重组现象，其中有6株毒株发生了不同基因型之间的基因重组现象。本研究毒株均位于Clade2.3.4.4分支，且与Re-8疫苗株相比在HA抗原区发生了1~3个氨基酸变异。　　为了研究H5N6亚型禽流感病毒对鸡的致病性以及水平传播能力，分别以0.1mL103 EID50/0.1mL和0.1mL106 EID50/0.1mL剂量点眼滴鼻感染4周龄SPF鸡，同时设定感染组和水平接触组。以0.1mL103 EID50/0.1mL剂量感染鸡的实验结果显示， A41毒株相比其�

关 键 词： 禽流感病毒 亚型 遗传演化 耐药性突变 分子特征 高致病性

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