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文献详细Journal detailed

农杆菌介导的小白菜遗传转化体系的构建

导  师: 徐晓峰;莫蓓莘

授予学位: 硕士

作  者: ();

机构地区: 深圳大学

摘  要: 十字花科芸薹属作物种类繁多,包含许多重要的蔬菜和油料作物,其中有大白菜、小白菜、甘蓝、芜菁、油菜等,它们在人类的生活和农业生产上有着极其重要的作用。其中白菜类作物为芸薹属中的栽培变种群,包含大白菜、小白菜、白菜型油菜等,原产于我国,目前广泛种植于中国,日本,韩国等亚洲国家。白菜作物代表之一的小白菜是重要的食用作物,主要种植于我国北方。目前在该类作物上,人们主要通过常规育种的手段以获得更好的产品品质,并提高产量。但是这种传统的育种技术存在生产成本高、操作困难、杂交不亲和等因素的限制,限制了育种工作的进一步发展。然而利用遗传转化技术,可以避免上述各类弊端,弥补常规育种的不足,更好地创造优良性状。遗传转化是以再生体系的建立为基础的。影响再生效率的因素有很多:植物的基因型、外植体的类型、诱导过程中使用的激素和其他化学物质的种类以及浓度比例等。遗传转化的成功率也受最佳苗龄,侵染菌种,侵染方式,适配的抗生素种类和浓度等多种因素的共同影响。本实验通过建立一个高效稳定的小白菜遗传转化体系,并获得沉默miR395的转基因植株。为将来研究mi R395对小白菜的抗逆能力的影响奠定了基础。此外,高效稳定的遗传转化体系还可为今后小白菜分子育种及基因功能验证提供了有利的技术手段。主要研究成果:1.以小白菜栽培品种春优三带柄子叶为外植体,研究了不同种类的激素浓度对小白菜再生频率的影响,建立了小白菜高效的再生体系。试验表明:以MS为基础培养基,最佳的芽分化、生根培养基分别为MS+0.6mg/L NAA+4mg/L6-BA+4mg/L AgNO3+0.25 mg/L ABA+30g/L蔗糖和MS+0.6mg/L IBA+10g/L蔗糖,不定芽诱导率和生根诱导率分别为57.6%和50%;2.优化了影响小白菜遗传转化的诸多因素,包括苗龄、筛选压浓度、�

关 键 词: 小白菜 离体再生 农杆菌 遗传转化

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