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芒果苷在大鼠体内血浆蛋白结合率及组织分布研究

导  师: 刘奕明

授予学位: 硕士

作  者: ;

机构地区: 广州中医药大学

摘  要: 目的:  1.建立准确,可靠,高效的液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)法测定大鼠血浆和磷酸盐缓冲液(PBS)中芒果苷的质量浓度;2.利用平衡透析法的原理,联合已建立的LC-MS/MS法考察芒果苷在糖尿病大鼠以及正常大鼠血浆中的蛋白结合率,并比较其差异性;3.建立准确,可靠,灵敏度高的液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)法测定大鼠血浆和各组织匀浆中芒果苷的质量浓度;4.采用已经建立的LC-MS/MS法考察芒果苷单体在正常大鼠体内的组织分布特征;并与知母单煎液、黄柏知母药对煎液给药后芒果苷的组织分布情况进行比较;考察糖尿病大鼠灌服同等剂量黄柏知母药对后芒果苷在体内的组织分布特征,同时比较与正常大鼠组间的分布差异性。  方法:  1.芒果苷在大鼠血浆和PBS缓冲液中测定方法的建立:以芦丁为内标,大鼠血浆样品采用蛋白沉淀法进行预处理,提取剂为乙腈∶乙酸(9∶1);色谱柱为日本资生堂CAPCELL PAK C18柱(150mm×2.0mm,5μm);洗脱方式:等度洗脱;分析时间:5min;流速:0.25 mL·min-1;柱温:30℃;进样量:5μL。检测方式为正离子多离子反应(MRM),用于定量分析的离子对为:m/z423.0→273.2(芒果苷);m/z611.5→303(内标芦丁)。  2.血浆蛋白结合率的测定:正常SD雄性大鼠随机分为正常对照组和糖尿病模型组,利用平衡透析法的原理,联合已建立的LC-MS/MS法测定大鼠血浆和PBS缓冲液中芒果昔的质量浓度,根据相应公式计算芒果苷在糖尿病大鼠与正常大鼠血浆中的蛋白结合率,对所得数据进行统计学分析。  3.芒果苷在大鼠血浆和组织匀浆中测定方法的建立:以芦丁为内标,大鼠血浆和组织匀浆样品均采用蛋白沉淀法预处理,血浆中提取剂为乙腈∶乙酸(体积比9∶1),组织匀浆中提取剂为乙腈∶乙酸(体积比40∶1);色谱柱为日本资生堂CAPCELL PAK C18柱(150mm×2.0mm�

关 键 词: 芒果苷 糖尿病 血浆蛋白结合率 组织分布

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