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文献详细Journal detailed

‘华龙非洲菊’VIGS体系的建立及其在基因功能分析上的应用

导  师: 何少云

授予学位: 硕士

作  者: ;

机构地区: 华南农业大学

摘  要: 非洲菊(Gerbera jamesonii Bolus)作为世界五大鲜切花之一而被广泛种植,然而我国却缺乏具有自主产权且受市场欢迎的非洲菊品种。传统的辐射、诱变或杂交育种技术周期长且缺乏方向性。分子育种不仅可以大大缩短育种周期,也可以定向地改良重要的观赏性状。分子育种需要鉴定基因的功能,然而非洲菊作为非模式物种,对其基因的功能研究还存在很大的挑战。病毒诱导基因沉默(VIGS)技术因其速度快,高通量,不需要遗传转化等优点而被广泛地应用于基因功能的研究。本研究首先应用高效液相色谱(HPLC)测定了台湾509非洲菊及其花色芽变新品种‘华龙非洲菊’(Gerbera jamesonii‘Hualong’)的花青素含量,利用qRT-PCR验证了实验室前期鉴定的差异表达基因并对其中6个基因在花芽发育过程中的表达变化进行了研究,然后构建了‘华龙非洲菊’的VIGS体系,并利用其分析了这些差异表达基因的潜在功能,主要研究成果如下:  1、应用HPLC(高效液相色谱)法对两种非洲菊中五种花青素进行测定,两个非洲菊品种均含有天竺葵素3,5-葡萄糖苷(Pel3,5-glu)、矮牵牛素3-葡萄糖苷(Pet3-glu)、矢车菊素3-葡萄糖苷(Cya3-glu)、锦葵素(Mal);其中矢车菊素的含量最高,分别约为天竺葵素、矮牵牛素和锦葵素素的10倍、20倍和3倍,但两个品种中均未检测到芍药素(Peo)。‘华龙非洲菊’中的四种花青素含量均高于台湾509非洲菊。  2、‘华龙非洲菊’和台湾509非洲菊基于转录组分析的与花色调控相关的11条差异表达基因实时荧光定量(qRT-PCR)验证表明,CHS(3个成员,2个 CHS1和CHS4)、F3’H、F3H、F3’5’H、ANS、ANT、UFGT、PDS、GST的表达情况一致。除F3’5’H在‘华龙非洲菊’花瓣中的表达下调外,其余10个基因均表达上调。基因在不同发育时期的表�

关 键 词: 非洲菊 差异表达 花芽发育 分子育种 基因鉴定 遗传转化

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