导　　师： 石磊; 谭贵良; 柏建山

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 华南理工大学

摘　　要： 异尖线虫和颚口线虫是两个重要的食源性寄生虫,其感染的病例呈世界性分布,对人类健康造成很大威胁。异尖线虫幼虫主要寄生于海鱼,颚口线虫幼虫主要寄生于淡水鱼,当人们食入生的或未熟的水产品,就可能感染颚口线虫病和异尖线虫病。联合国粮农组织(FAO)将寄生虫列为水产品中生物危害因子之首,其中包括异尖线虫和颚口线虫,异尖线虫和颚口线虫也是我国入境水产品中主要的检疫性寄生虫。但目前使用的检测方法相对滞后,费时费力,而LAMP和实时荧光PCR是快速准确的检测方法,具有特异性好、灵敏度高的特点。因此,本研究对广州机场口岸入境水产品中的异尖线虫和颚口线虫进行检查,并建立快速准确的检测方法,为异尖线虫和颚口线虫的防控提供新的思路。本研究对广州机场口岸入境的214批海鱼进行检查,有10批次感染异尖线虫,对虫体进行鉴定发现有简单异尖线虫、典型异尖线虫和抹香鲸异尖线虫。来自印度尼西亚和菲律宾的19批次黄鳝中有11批次感染颚口线虫,鉴定结果为棘颚口线虫和刚刺颚口线虫。同时,在福建漳州地区的泥鳅黄鳝体内分类到了棘颚口线虫和日本颚口线虫。根据虫种的致病性和危害,我们建立了简单异尖线虫、典型异尖线虫和棘颚口线虫的LAMP检测方法,进行特异性、灵敏度和实际样品等一系列验证实验,其特异性好,与相关寄生虫没有交叉反应,灵敏度高,最低检测限可达1 fg/μL,对实际样品的检测与传统鉴别方法结果一致。棘颚口线虫是亚洲地区广泛存在的致病种,本研究建立了棘颚口线虫的实时荧光PCR检测方法,进行了特异性和重复性实验,与比对虫种无交叉反应,重复实验之间变异系数在2%以内,建立了10倍梯度稀释样品的标准曲线,其最低检测限可达10 copies/μL。本研究对入境水产品中异尖线虫和颚口线虫的检查数据为有关

关 键 词： 异尖线虫 颚口线虫 分类鉴定 环介导等温扩增 实时荧光

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