导　　师： 李健

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 广东药科大学

摘　　要： 目的:本论文主要选取了病毒理化性质都具有代表性(病毒大小、核酸类型以及有无包膜),并至少应包括一种对物理和/或化学处理有明显抗性的病毒,所以选择了伪狂犬病毒(Pseudorabies Virus,PRV)、水疱性口炎病毒(Vesicular Stomatitis Virus,VSV)、辛德毕斯病毒(Sindbis virus,SINV)作为脂包膜指示病毒,猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)作为非脂包膜指示病毒,进行灭活工艺验证,按照《血液制品去除/灭活病毒技术方法及验证指导原则》的要求病毒滴度降低量应≥4 logs。研究方法:本论文设置紫外照射剂量为0J/m、300J/m、450J/m、600J/m、750J/m、900J/m,将纤维蛋白原/凝血酶和病毒按照体积比9:1混合,之后进行紫外照射,用细胞病变法将照射前后的病毒滴度进行测定,Reed-Muench法计算病毒效价。用紫外分光光度法测定紫外照射前后纤维蛋白原的蛋白含量,依据中国药典2015版中的凝血酶冻干粉的效价测定方法测定紫外照射前后的凝血酶效价,用SDS-PAGE评价紫外照射前后纤维蛋白原和凝血酶的蛋白结构是否发生变化。本实验还将实验中的紫外照射剂量应用于流动式紫外灭活仪中,验证流动式紫外灭活仪的灭活效果。结果:紫外照射剂量900J/m、600J/m分别可以有效地灭活纤维蛋白原和凝血酶中的猪细小病毒、伪狂犬病毒、辛德毕斯病毒和水疱性口炎病,使其病毒滴度下降≥4.00 logs。在经过剂量为900J/m、600J/m的紫外照射下,紫外照射前后的纤维蛋白原的浓度不存在显著性差异,凝血酶的效价存在显著性差异,但仍在国家规定的凝血酶活性含量范围(85%15%)内。且照射前后纤维蛋白原和凝血酶的蛋白条带和照射前的条带在同一位置,蛋白的结构没有发生变化。在300J/m紫外照射剂量下,流动式紫外灭活仪也能使纤维蛋白原中的伪狂犬病毒灭活下降≥4.00 logs,达到病毒灭活的要求。结论:紫外照射剂量900J/m�

关 键 词： 紫外照射 病毒灭活 纤维蛋白原 凝血酶

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